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zhouwenjie

木虫 (小有名气)

[求助] 做DGGE 提DNA时PCR所用引物和测序前PCR所用引物可以不同吗? 已有2人参与

刚接触分子实验,对原理不太清楚。我做土壤细菌的DGGE,提出DNA后以338f和518r为引物扩增后做DGGE。现在想对条带进行测序,想用8-27f和1378-1401r做引物扩增,不知道这样可以吗?求大神们解答。希望有经验的亲们帮助!谢谢!大谢!
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做最好的自己!
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lance-tan

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhouwenjie at 2014-12-05 16:57:10
是的,是V3区,条带测序,但是要不要克隆还没定。...

切割回收的条带只有200多bp吧,一般都是做克隆然后测序吧。
新手入门求各位大神指导
8楼2014-12-05 18:48:35
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zshw_001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhouwenjie(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-02 18:38:39
引物都是在序列上设的就可以,只要能P出就可以了。
永远相信未知的总是美好的!
2楼2014-12-02 17:57:00
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lance-tan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你测序的时候换那对引物的目的是什么?
新手入门求各位大神指导
3楼2014-12-04 12:15:28
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zhouwenjie

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zshw_001 at 2014-12-02 17:57:00
引物都是在序列上设的就可以,只要能P出就可以了。

我不太懂原理,但是有人跟我说这样测出来会不准!
做最好的自己!
4楼2014-12-05 12:09:46
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