24小时热门版块排行榜    

查看: 1431  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zb61788260

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于载体构建中如何确定目的基因 已有2人参与

我想将核桃中的一种蛋白构建载体进行原核表达,但是这种蛋白的氨基酸序列直接在NCBI中找到显示的是2S albumin seed storage protein precursor mRNA, partial cds,它是之前某个学者在发表的一篇文献中鉴定出来的,但是显示的是“ precursor mRNA, partial cds”,我想问我可以直接拿这段核苷酸序列来对其构建载体进行蛋白表达吗?表达出的蛋白能够跟天然的蛋白序列保持一致吗?还是需要我自己构建它的cDNA文库然后筛选出序列呢?菜鸟一只,希望大神们解惑!感激不尽...
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zb61788260 at 2014-11-26 17:12:22
那自己克隆基因的方法就是您说的使用RACE测序吗?我做食品的,对分子生物学方面不怎么懂。我看的有些文献里说的是构建核桃种子的cDNA文库再筛选我需要的目的基因,跟您说的方法不一样吧?你能稍微说具体些“自己克 ...

先建文库再筛选是一种方法。
RACE是另外一种方法。你的领域我不清楚。抱歉
慎思明辨博学笃行
6楼2014-11-26 17:20:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果文库没有cDNA序列,得自己RACE测序。
慎思明辨博学笃行
2楼2014-11-24 20:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zb61788260

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-24 20:04:15
如果文库没有cDNA序列,得自己RACE测序。

我没明白你说的什么意思啊?可以具体详细一些吗?什么叫文库没有cDNA序列?
3楼2014-11-25 16:26:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


dllchina: 金币+1, 鼓励交流 2014-11-25 23:52:30
如果只查到precusor mRNA, partial cds,没查到成熟mRNA序列,就无法推出cDNA(互补DNA)。你只能自己克隆基因了。
慎思明辨博学笃行
4楼2014-11-25 17:09:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了,中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见