24小时热门版块排行榜    

查看: 1065  |  回复: 7
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zb61788260

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于载体构建中如何确定目的基因 已有2人参与

我想将核桃中的一种蛋白构建载体进行原核表达,但是这种蛋白的氨基酸序列直接在NCBI中找到显示的是2S albumin seed storage protein precursor mRNA, partial cds,它是之前某个学者在发表的一篇文献中鉴定出来的,但是显示的是“ precursor mRNA, partial cds”,我想问我可以直接拿这段核苷酸序列来对其构建载体进行蛋白表达吗?表达出的蛋白能够跟天然的蛋白序列保持一致吗?还是需要我自己构建它的cDNA文库然后筛选出序列呢?菜鸟一只,希望大神们解惑!感激不尽...
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zb61788260

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-25 17:09:19
如果只查到precusor mRNA, partial cds,没查到成熟mRNA序列,就无法推出cDNA(互补DNA)。你只能自己克隆基因了。

那自己克隆基因的方法就是您说的使用RACE测序吗?我做食品的,对分子生物学方面不怎么懂。我看的有些文献里说的是构建核桃种子的cDNA文库再筛选我需要的目的基因,跟您说的方法不一样吧?你能稍微说具体些“自己克隆基因”所用的技术及步骤之类的吗?我想了解学习一下,谢谢!
5楼2014-11-26 17:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 8 个回答

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果文库没有cDNA序列,得自己RACE测序。
慎思明辨博学笃行
2楼2014-11-24 20:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zb61788260

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-24 20:04:15
如果文库没有cDNA序列,得自己RACE测序。

我没明白你说的什么意思啊?可以具体详细一些吗?什么叫文库没有cDNA序列?
3楼2014-11-25 16:26:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


dllchina: 金币+1, 鼓励交流 2014-11-25 23:52:30
如果只查到precusor mRNA, partial cds,没查到成熟mRNA序列,就无法推出cDNA(互补DNA)。你只能自己克隆基因了。
慎思明辨博学笃行
4楼2014-11-25 17:09:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 江苏省农科院招调剂1名 +3 Qwertyuop 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:18 by aaadim
[考研] 0854复试调剂 276 +3 wmm9 2026-03-01 3/150 2026-03-01 23:13 by 热情沙漠
[考研] 275求调剂 +3 明远求学 2026-03-01 3/150 2026-03-01 22:29 by 刘兵
[考研] 274求调剂 +3 cgyzqwn 2026-03-01 6/300 2026-03-01 21:24 by cgyzqwn
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:47 by 无懈可击111
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 6/300 2026-03-01 17:32 by 想申博!
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 课题组接收材料类调剂研究生 +3 gaoxiaoniuma 2026-02-28 4/200 2026-03-01 14:30 by jjj三跨
[考研] 295复试调剂 +3 简木ChuFront 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:27 by zzxw520th
[考研] 284求调剂 +6 天下熯 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:19 by Ducount.Y
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见