应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 关于载体构建中如何确定目的基因
81/1返回列表
查看: 1107  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

zb61788260

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于载体构建中如何确定目的基因 已有2人参与

我想将核桃中的一种蛋白构建载体进行原核表达，但是这种蛋白的氨基酸序列直接在NCBI中找到显示的是2S albumin seed storage protein precursor mRNA, partial cds，它是之前某个学者在发表的一篇文献中鉴定出来的，但是显示的是“ precursor mRNA, partial cds”，我想问我可以直接拿这段核苷酸序列来对其构建载体进行蛋白表达吗？表达出的蛋白能够跟天然的蛋白序列保持一致吗？还是需要我自己构建它的cDNA文库然后筛选出序列呢？菜鸟一只，希望大神们解惑！感激不尽...
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-11-24 16:44:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果文库没有cDNA序列，得自己RACE测序。
赞一下 回复此楼
慎思明辨博学笃行
2楼2014-11-24 20:04:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zb61788260

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-24 20:04:15
如果文库没有cDNA序列，得自己RACE测序。

我没明白你说的什么意思啊？可以具体详细一些吗？什么叫文库没有cDNA序列？
赞一下 回复此楼
3楼2014-11-25 16:26:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
dllchina: 金币+1, 鼓励交流 2014-11-25 23:52:30
如果只查到precusor mRNA, partial cds，没查到成熟mRNA序列，就无法推出cDNA(互补DNA)。你只能自己克隆基因了。
赞一下 回复此楼
慎思明辨博学笃行
4楼2014-11-25 17:09:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zb61788260

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by guoliwang at 2014-11-25 17:09:19
如果只查到precusor mRNA, partial cds，没查到成熟mRNA序列，就无法推出cDNA(互补DNA)。你只能自己克隆基因了。

那自己克隆基因的方法就是您说的使用RACE测序吗？我做食品的，对分子生物学方面不怎么懂。我看的有些文献里说的是构建核桃种子的cDNA文库再筛选我需要的目的基因，跟您说的方法不一样吧？你能稍微说具体些“自己克隆基因”所用的技术及步骤之类的吗？我想了解学习一下，谢谢！
赞一下 回复此楼
5楼2014-11-26 17:12:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guoliwang

至尊木虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zb61788260 at 2014-11-26 17:12:22
那自己克隆基因的方法就是您说的使用RACE测序吗？我做食品的，对分子生物学方面不怎么懂。我看的有些文献里说的是构建核桃种子的cDNA文库再筛选我需要的目的基因，跟您说的方法不一样吧？你能稍微说具体些“自己克 ...

先建文库再筛选是一种方法。
RACE是另外一种方法。你的领域我不清楚。抱歉
赞一下 回复此楼
慎思明辨博学笃行
6楼2014-11-26 17:20:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aabbwestone

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

通过RACE可以得到你要的目的蛋白的mRNA完整序列，再找到cDNA，就可以直接构建表达载体了
赞一下 回复此楼
rightbackinthewater
7楼2014-11-28 20:20:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
dllchina: 金币+1, 鼓励交流 2014-11-30 00:11:48
不用race，先把orf框克隆出来，表达一下看看

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
8楼2014-11-29 20:41:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zb61788260 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854调剂 +10 长弓傲 2026-04-11 11/550 2026-04-13 10:38 by wp06
[考研] 266调剂 +10 daya sun 2026-04-07 11/550 2026-04-13 10:12 by fenglj492
[考研] 考研英一数一338分 +6 长江大学东校区 2026-04-13 7/350 2026-04-13 09:40 by fqwang
[考研] 271求调剂 +23 2261744733 2026-04-11 23/1150 2026-04-13 08:48 by 学zh
[考研] 211本科材料化工求调剂 +17 YHLAH 2026-04-11 20/1000 2026-04-13 08:46 by Sammy2
[考研] 一志愿中南大学 0855 机械 286 求调剂 +10 不会吃肉 2026-04-12 10/500 2026-04-12 22:51 by 零零二
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成！
[考研] 288求调剂，一志愿华南理工大学071005 +18 ioodiiij 2026-04-08 18/900 2026-04-11 20:25 by liyun12321
[考研] 电子信息279求调剂，有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 求调剂 +13 雪逢冬 2026-04-10 13/650 2026-04-11 09:58 by 猪会飞
[考研] 22408调剂求助 +7 毂12 2026-04-09 9/450 2026-04-11 09:23 by 哦哦123
[考研] 0854调剂 +4 长弓傲 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:18 by 猪会飞
[考研] 346，工科0854求调剂，专硕 +7 moser233 2026-04-10 8/400 2026-04-11 08:52 by 猪会飞
[论文投稿] mdpi小修rvr时间四五天了 20+3 哈哈high 2026-04-08 5/250 2026-04-10 16:02 by 北京莱茵润色
[考研] 一志愿中科大070300化学，314分求调剂 +12 wakeluofu 2026-04-09 12/600 2026-04-10 09:57 by liuhuiying09
[考研] 085404，285分求调剂 +12 薇薇考研 2026-04-07 14/700 2026-04-09 23:10 by parmtree
[考研] 085404，334分，求调剂 +5 sunjie8888 2026-04-08 8/400 2026-04-09 07:26 by sunjie8888
[考研] 一志愿哈工大，初试329，求环境科学与工程调剂！ +11 余未辛 2026-04-06 11/550 2026-04-08 15:21 by screening
[考研] 338求调剂 +5 小猪红色 678 2026-04-06 6/300 2026-04-07 21:18 by 乔哒哒哒
[考研] 一志愿西南090202求调剂 +4 在线求有学上 2026-04-07 4/200 2026-04-07 19:47 by biomichael
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭