最近刚刚开始做PCR,遇到一个问题，同一个基因，取虫子的六个不同组织的cDNA模板，设计了三对不同的引物，其中两对扩增结果是一样的，见图1,2,另一对引物比较特别，六个组织中基因表达量一点差异都没有，见图3（图1,2,3都是30个循环下，退火温度50度），对于第三对引物我又试了降低循环数（25c,27c），提高退火温度(55,63度)，还是没差异，
所以觉得很奇怪，即便actin也达不到如此一致，而且第三对引物扩出来的就是目的片段，做其它实验时顺便回收测了序，没有问题，
那么三对引物不一样，到底以哪个为准呢？
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