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chicktrick

铁虫 (初入文坛)

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[求助] 求助引物设计问题已有1人参与

最近在做基因克隆老师给了一段拼接的序列以及他的orf 想把orf克隆出来并测序结果设计引物之后总是没有好的目的条带请教一下各位这是什么情况该怎么解决。

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1楼2014-10-29 23:58:28

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chicktrick

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求大神们啊只是引物设计问题么

2楼2014-10-30 09:32:08

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xfxycy3090

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-10-30 11:29:33

1、拼接的序列是指基因组测序拼接的吗？
2、如果是基因组拼接的序列，先要经过PCR验证，你可以扩大扩增片段长度，确定ORF序列是否是那段序列
3、多设计几对引物，优化PCR条件，比如梯度PCR、touchdown PCR试一试

3楼2014-10-30 09:53:46

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