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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助引物设计问题
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chicktrick

铁虫 (初入文坛)

[求助] 求助引物设计问题已有1人参与

最近在做基因克隆 老师给了一段拼接的序列以及他的orf 想把orf克隆出来并测序 结果设计引物之后总是没有好的目的条带 请教一下各位这是什么情况 该怎么解决。
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1楼2014-10-29 23:58:28
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chicktrick

铁虫 (初入文坛)
求大神们啊 只是引物设计问题么
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2楼2014-10-30 09:32:08
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xfxycy3090

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-10-30 11:29:33
1、拼接的序列是指基因组测序拼接的吗？
2、如果是基因组拼接的序列，先要经过PCR验证，你可以扩大扩增片段长度，确定ORF序列是否是那段序列
3、多设计几对引物，优化PCR条件，比如梯度PCR、touchdown PCR试一试
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-30 09:53:46
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