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丑得完美

银虫 (初入文坛)

[求助] 基因组DNA直接PCR和总RNA RT-PCR最后得到的产物有什么区别? 已有3人参与

如题
还有一个问题,
PCR后直接测序和连接载体测序有什么区别?
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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丑得完美: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-10-24 09:08:02
1. 看是真核还是原核生物,真核生物RT-PCR的产物中不包括内含子,原核生物应该没什么区别;
2. 不连载体的DNA片段测序一般得不到两端序列,且两端所得结果一般不准确,而连到载体上,用通用引物测序可以得到完整的序列
2楼2014-10-23 22:17:51
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

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丑得完美: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-10-24 09:08:25
这个我们首先要明确基因组PCR和总RNA的RT-PCR的目的是什么,前者在于的到某基因的大量扩增,后者则一般是确定某个基因的表达情况,这个应该是两者之间的主要区别。
坚持到底就是胜利!
3楼2014-10-24 00:27:54
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丑得完美

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cuihao102 at 2014-10-23 22:17:51
1. 看是真核还是原核生物,真核生物RT-PCR的产物中不包括内含子,原核生物应该没什么区别;
2. 不连载体的DNA片段测序一般得不到两端序列,且两端所得结果一般不准确,而连到载体上,用通用引物测序可以得到完整的 ...

真核生物,不做表达,只测序,基因组DNA直接PCR可以么?
4楼2014-10-24 09:07:43
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cuihao102

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


丑得完美(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-24 20:43:31
可以啊,如果只是想知道一段DNA的序列那还是用基因组吧,这样比较完整
5楼2014-10-24 10:59:44
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
丑得完美(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-24 20:43:20
有内含子的差别,测序时质粒的纯度显然比PCR产物高多了。
6楼2014-10-24 12:25:44
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