24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1986  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

露的想念

新虫 (小有名气)

[求助] 最近在做原核表达纯化,但是蛋白一直都没有诱导出来。好捉急啊! 已有2人参与

最近在构建表达人的6KD左右的蛋白,从生物公司合成的基因,以及是公司构建的表达载体(pET-30a),用的是His标签,拿回来换了许多诱导条件,在相应的位置上也没有条带,有人建议说把目的基因切下来重新连到pET-30a上,大家觉得有这种必要吗?有没有人遇到这种情况啊?急急急
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

露的想念

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by stone2239 at 2014-10-23 18:22:35
1.表达载体是否已经过测序验证,如果没有,一定要做。
2.如果测序没有问题,那可能就是诱导条件的问题,一通常做法是改变诱导物IPTG浓度、降低表达温度。

没有测序了,从公司拿回来就看了一下公司给的序列,没问题,试了好多诱导条件,还是不行啊
3楼2014-10-23 18:44:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1.表达载体是否已经过测序验证,如果没有,一定要做。
2.如果测序没有问题,那可能就是诱导条件的问题,一通常做法是改变诱导物IPTG浓度、降低表达温度。
2楼2014-10-23 18:22:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

scqing

捐助贵宾 (小有名气)


是不是表达出来,但没挂上镍柱?
4楼2014-10-24 14:05:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

myheat

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
6k不好表达,换pet32试试

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-10-24 21:06:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 328求调剂 +16 lftmya 2026-04-07 17/850 2026-04-08 18:45 by 环化材-小生
[考研] 一志愿哈工大,初试329,求环境科学与工程调剂! +11 余未辛 2026-04-06 11/550 2026-04-08 15:21 by screening
[硕博家园] 有没有学校材料专业收跨调(一志愿085410) +3 momo(上岸版) 2026-04-06 6/300 2026-04-08 14:53 by 化学521
[考研] 288环境专硕,求调材料方向 +35 lllllos 2026-04-04 39/1950 2026-04-07 23:24 by 一只好果子?
[考研] 312求调剂 +18 gtw1 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 18:16 by 蓝云思雨
[考研] 0854求调剂 +9 亨氏番茄沙司 2026-04-06 10/500 2026-04-07 14:37 by shdgaomin
[考研] 一志愿武理车辆专硕总分 281 求调剂 +4 上岸研究生. 2026-04-02 4/200 2026-04-07 09:52 by 加油向未来啊
[考研] 材料调剂 +6 一样YWY 2026-04-05 6/300 2026-04-05 20:30 by 南航~万老师
[考研] 326求调剂 +3 顾若浮生 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:32 by 蓝云思雨
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +4 崔wj 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:06 by imissbao
[考研] 一志愿北京化工大学,初试成绩350求调剂 +9 沿岸?贝壳 2026-04-04 14/700 2026-04-05 01:09 by 沿岸?贝壳
[考研] 环境285分,过六级,求调剂 +10 xhr12 2026-04-02 10/500 2026-04-04 21:53 by bn53987
[考研] 316求调剂 +9 墨辰_Orion926 2026-04-04 9/450 2026-04-04 21:35 by lbsjt
[考研] 一志愿0817化学工程与技术,求调剂 +24 我不是只因 2026-04-02 28/1400 2026-04-04 15:15 by dongzh2009
[考研] 怎么删帖子啊 +3 缝曦1000 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:20 by 土木硕士招生
[考研] 297求调剂 +11 ljy20040718! 2026-04-03 13/650 2026-04-04 09:23 by 来看流星雨10
[考研] 化工求调剂 +11 荔香芝士椰奶 2026-04-03 11/550 2026-04-03 22:06 by 啵啵啵0119
[考研] 294求调剂 +6 Grey_Ey 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:46 by 欣喜777
[考研] 工科341分调剂 +3 洛多罗 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:20 by 1753564080
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:03 by yulian1987
信息提示
请填处理意见