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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒酶切弥散
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starfire2012

新虫 (初入文坛)

[求助] 质粒酶切弥散 已有1人参与

亲们，我提取的慢病毒载体，酶切以后有的会弥散，只有很少不弥散。求指导！！！谢谢！！！
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1楼 2014-10-09 10:41:16
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流！ 2014-10-09 18:45:50
starfire2012: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-10-10 10:44:55
原因可能有以下几种情况，请参考
1，质粒提取不好，重新提。
2，酶切体系不正确，导致星号活性。
3，酶切时间太长。
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学习再学习，努力再努力。
2楼2014-10-09 16:03:16
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starfire2012

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jian212 at 2014-10-09 16:03:16
原因可能有以下几种情况，请参考
1，质粒提取不好，重新提。
2，酶切体系不正确，导致星号活性。
3，酶切时间太长。

我双酶切弥散，改单酶切半小时还是弥散。质粒也重新提了还是不行。再看看酶切体系吧。谢啦、
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3楼2014-10-10 10:46:10
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jian212

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by starfire2012 at 2014-10-10 10:46:10
我双酶切弥散，改单酶切半小时还是弥散。质粒也重新提了还是不行。再看看酶切体系吧。谢啦、...

还有一种情况是感受态细胞本身的问题，BL21 的 就容易引起质粒的降解，其他感受态不详。。
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学习再学习，努力再努力。
4楼2014-10-11 15:19:43
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