应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » reverse PCR 线性化载体
51/1返回列表
查看: 4698  |  回复: 6
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

tubulifera

木虫 (正式写手)

[求助] reverse PCR 线性化载体已有3人参与

大家好，有谁用过clontech公司的Infusion cloning kit的，我用reverse PCR 对大小为10kb的载体线性化，然后与一个800bp的片段连接，在平板上也长了单菌落，但是测序发现，片段插入的位置不对，有些克隆与原载体比少了很多。请求大家给予帮助，是用PCR线性化的问题吗？还是其他的问题。在此先表示感谢！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2014-10-09 08:00:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

neoandkidd

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

是不是引物设计错了，一个基因infuaion很容易做的啊。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下 回复此楼
新起点
6楼2014-10-15 06:15:27
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

陌路行客

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-09 14:04:48
确定是单酶切位点吗？
赞一下 回复此楼
人生中的悲剧太多了
2楼2014-10-09 08:16:00
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
聚合酶有时也有外切酶活性

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-09 20:06:21
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tubulifera

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 陌路行客 at 2014-10-09 08:16:00
确定是单酶切位点吗？

没有酶切位点，我才选择用reverse PCR线性化，如果有酶切位点的话我就直接用酶切了。谢谢你的回复！
赞一下 回复此楼
4楼2014-10-10 09:04:32
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭