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tubulifera

木虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 627794
注册: 2008-10-16
专业: 农业昆虫学

[求助] reverse PCR 线性化载体已有3人参与

大家好，有谁用过clontech公司的Infusion cloning kit的，我用reverse PCR 对大小为10kb的载体线性化，然后与一个800bp的片段连接，在平板上也长了单菌落，但是测序发现，片段插入的位置不对，有些克隆与原载体比少了很多。请求大家给予帮助，是用PCR线性化的问题吗？还是其他的问题。在此先表示感谢！！

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1楼2014-10-09 08:00:20

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陌路行客

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-10-09 14:04:48

确定是单酶切位点吗？

人生中的悲剧太多了

2楼2014-10-09 08:16:00

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