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yanggoing

金虫 (小有名气)

[求助] 质粒提取不出来 已有3人参与

最近新购买了大肠杆菌,里面的质粒怎么也提取不出来。还麻烦高手帮我看看是什么原因所致。加了抗生素能生长,且也没有污染杂菌。提取过程如下,挑取单菌落于1ml LB培养基培养4小时,后转移50ul至25ml LB中过夜培养,菌量也看过,没有问题。用的是天根试剂盒提取,步骤都是按它上面的做,后面检测总是没有条带。请各位高手帮我看看是什么原因,谢谢
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小猪没长毛

铁虫 (小有名气)

我么用的手工提法,我觉得还是菌液有问题,不然很好提的
IamOK
10楼2014-10-10 10:59:32
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查看全部 18 个回答

生物是个坑

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yanggoing: 金币+5 2014-10-08 21:02:26
提完建议测下浓度,你说的检测是跑的电泳?按照你的秒杀若是操作没有问题那么换换试剂盒或者是传统方法SDS碱裂解法做一次试试。
2楼2014-10-08 15:49:04
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白风

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
建议换个试剂盒试试。
3楼2014-10-08 16:29:53
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去哪里看海

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼主,你的大肠杆菌确实里面有质粒对吗???
没有用过天根的试剂盒,我们用的索莱宝,不过试剂盒的问题应该不是主要的吧??没过期吧??溶液I加入酶了吗?
4楼2014-10-08 19:09:02
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