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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » ph和盐浓度对his标签蛋白挂柱有何影响？
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1020490511

银虫 (小有名气)

[求助] ph和盐浓度对his标签蛋白挂柱有何影响？ 已有1人参与

鄙人最近在做his标签蛋白纯化，遇到一些问题：1，盐浓度nacl对挂柱有何影响？多少的盐浓度对挂柱比较好？我用的是0.15 M的氯化钠。2.蛋白所带电荷对镍柱纯化有何影响？目的蛋白等电点预测为6.4。目前A液用的ph值为7.4。还请各位大侠多多指教！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-09-22 15:55:50
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
咪唑是共轭环，在紫外吸收是一定的，没有想过要消除，不太重要吧，如果要定量，收集蛋白后以收集部分咪唑浓度调零，然后再测280。
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行至水穷处，坐看云起时
4楼2014-09-23 23:15:58
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pennchem

专家顾问 (正式写手)
盐浓度基本不影响
pH值越高，越有利于挂柱
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-09-22 20:08:34
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1020490511

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-09-22 20:08:34
盐浓度基本不影响
pH值越高，越有利于挂柱

再问一下大侠，在用AKTA做纯化时，如何抵消咪唑的吸收峰？我在过柱子时，随着B液咪唑百分比上升，紫外吸收也成斜线上升。影响蛋白吸收峰的显示。

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-09-23 10:52:33
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