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银虫 (小有名气)

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[求助] ph和盐浓度对his标签蛋白挂柱有何影响？已有1人参与

鄙人最近在做his标签蛋白纯化，遇到一些问题：1，盐浓度nacl对挂柱有何影响？多少的盐浓度对挂柱比较好？我用的是0.15 M的氯化钠。2.蛋白所带电荷对镍柱纯化有何影响？目的蛋白等电点预测为6.4。目前A液用的ph值为7.4。还请各位大侠多多指教！

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

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1楼 2014-09-22 15:55:50

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pennchem

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盐浓度基本不影响
pH值越高，越有利于挂柱

行至水穷处，坐看云起时

2楼2014-09-22 20:08:34

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pennchem

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

咪唑是共轭环，在紫外吸收是一定的，没有想过要消除，不太重要吧，如果要定量，收集蛋白后以收集部分咪唑浓度调零，然后再测280。

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行至水穷处，坐看云起时

4楼2014-09-23 23:15:58

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