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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 高等电点（pI8.3）his融合蛋白纯化，选用何种缓冲液？
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joyjane88

铜虫 (初入文坛)

[求助] 高等电点（pI8.3）his融合蛋白纯化，选用何种缓冲液？

最近要纯化一个his融合蛋白，预测pI约8.3为碱性蛋白。打算用Ni柱纯化，问一下应配制PH为多少的buffers？听说缓冲液pH应偏离pI约2~3个单位，我配的缓冲液应该小于6.3还是大于10.3好呢？是用磷酸盐缓冲系统还是tris-hcl系统？感激不尽！！！
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1楼 2011-09-25 19:02:50
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nach

铜虫 (著名写手)

不让吃就去死

【答案】应助回帖

★
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-09-25 20:57:31
joyjane88(金币+2): 2011-09-27 19:36:28
个人感觉没有太大影响 用中性的好了
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不让吃就去死
2楼2011-09-25 20:15:38
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sspxiaoji

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利！ 2011-09-28 08:49:31
亲合柱影响不大。tris-hcl就很好。
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3楼2011-09-26 12:04:40
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joyjane88

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sspxiaoji at 2011-09-26 12:04:40:
亲合柱影响不大。tris-hcl就很好。

谢谢，不太会搞，把分给第一个回复的人了，无法给你金币了。特此道谢！
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4楼2011-09-27 19:39:47
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辉辉集团

银虫 (正式写手)
你又不是做PH值洗脱  原理不一样的
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5楼2011-09-28 08:30:09
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joyjane88

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 辉辉集团 at 2011-09-28 08:30:09:
你又不是做PH值洗脱  原理不一样的

据说是为了避免Buffer的pH与蛋白的pI接近，导致蛋白直接沉淀，无法留在上清中。有这种情况吗？
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6楼2011-09-28 20:22:31
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辉辉集团

银虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by joyjane88 at 2011-09-28 20:22:31:
据说是为了避免Buffer的pH与蛋白的pI接近，导致蛋白直接沉淀，无法留在上清中。有这种情况吗？

等电点沉淀的问题必须考虑 你可以试试的
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7楼2011-09-29 09:21:10
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edoz1986

新虫 (小有名气)
ph10已经是极性ph了
常用的就是7.4的pbs和8.0的tris-hcl
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8楼2013-05-23 15:01:52
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