应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 分类/鉴定 » 求教：是否需要克隆测序，还是仅PCR测序就足够了？
汕头大学海洋科学接受调剂
51/1返回列表
查看: 1113  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

曼妥思薄荷糖

新虫 (初入文坛)

[求助] 求教：是否需要克隆测序，还是仅PCR测序就足够了？ 已有4人参与

我从环境中分分离某种目的细菌，对样品分离纯化后，提出DNA后进行测序，是否需要克隆测序，还是仅PCR测序就足够了？谁能给我说说两者的区别，克隆测序是否有必要？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-27 09:37:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
单向PCR是初步鉴定，决定是否要当做新种的前一步，还有就是别人寄给你菌种，测个单反应，验证一下。
克隆一般是为了构建系统进化树~（说明你前一步比对相似度很低~有新种的潜力）
赞一下 回复此楼
4楼2014-08-27 22:22:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

RuyangHan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你的目的是什么？ 假如就想知道序列，PCR测序就够了。PCR测序测定是你PCR扩增出来的DNA片段（包括很多拷贝），克隆测序的话是把PCR产物其中一个片段连到载体然后在细胞中有复制了很多质粒，然后用质粒做底物来测序，所以克隆测序就是测其中的一个片段。
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-27 12:46:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuren2009

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
曼妥思薄荷糖(dllchina代发): 金币+2, 正解 2014-08-27 22:20:04
简单来说，克隆测序就是最后得出的序列包括你的引物，直接测序序列前后50左右的碱基是不准确的，没有引物序列。你要是个准确鉴定或发文章用，最好作个克隆，但成本高一些。
赞一下 回复此楼
学习使你立于不败之地
3楼2014-08-27 17:24:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

peterrjp

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
曼妥思薄荷糖: 金币+18, ★★★很有帮助 2014-10-26 10:58:12
PCR产物可以做高通量测序，不过根据方法的不同需要使用特殊的引物和加入barcode序列。
克隆测序是将PCR产物连接到载体质粒上，质粒再通过转化进入感受态细胞，细胞拿去涂板，形成单菌落后，挑取单菌落拿去做Sanger测序。
环境来源的PCR产物不可以直接拿去做传统的Sanger测序，因为PCR产物不是来自单一纯菌，做不了Sanger测序
除非你已经分离得到了纯菌，PCR产物才能做Sanger测序
赞一下 回复此楼
5楼2014-10-25 15:45:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 山东省基金2026 +7 jerry681 2026-04-08 9/450 2026-04-14 22:01 by 阿勇的篮球
[考研] 302分求调剂 +10 凡语祈愿 2026-04-08 11/550 2026-04-14 16:50 by jiangguiquan11
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +8 超人不会飞@ 2026-04-08 8/400 2026-04-14 16:06 by zs92450
[考研] 药学305求调剂 +10 玛卡巴卡boom 2026-04-10 10/500 2026-04-14 15:55 by zs92450
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[考研] 085408光电信息工程专硕355一志愿长春光机所调剂 +6 王ymaa 2026-04-13 13/650 2026-04-14 11:33 by 王ymaa
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +4 双一流本科机械 2026-04-08 4/200 2026-04-14 07:32 by Abskk
[考研] 一志愿211 0703化学 346分求调剂 +26 土豆er? 2026-04-09 29/1450 2026-04-13 15:15 by 独醉梦孤城
[考研] 339求调剂 +4 hanwudada 2026-04-12 4/200 2026-04-13 12:03 by 蓝云思雨
[考研] 求调剂 +16 张番茄不炒蛋 2026-04-10 17/850 2026-04-12 13:58 by 熬夜成！
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 药学专硕调剂 +8 ? 一路生?花? 2026-04-10 10/500 2026-04-11 21:21 by zhouxiaoyu
[考研] 电子信息279求调剂，有书读就行 +8 wwwooden 2026-04-08 11/550 2026-04-11 20:22 by cq2548
[考研] 314求调剂 +18 xhhdjdjsjks 2026-04-09 19/950 2026-04-10 18:53 by HPUCZ
[考研] 机械专368 有去处吗 +4 种大树 2026-04-10 4/200 2026-04-10 15:31 by jiajinhpu
[考研] 一志愿华东师范生物学326分，求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 材料化工总分334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 20:19 by maddjdld
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 0860004 求调剂 309分 +6 Yin DY 2026-04-09 6/300 2026-04-09 10:19 by 啊李999
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭