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jasminezhao

金虫 (小有名气)

[交流] PCR 点突变 测序 已有1人参与

我想请教一下各位:我做点突变PCR,用的是QuikChange® II XL Site-Directed
Mutagenesis Kit试剂盒,我想知道的是在获得单克隆抗体时,对其进行之力提纯,再送去测序之前是否要对其进行检测,如果需要要怎么进行检测,还是提完质粒之后直接送去测序?谢谢!
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ccharlien

木虫 (正式写手)


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不需要再检测,直接测序就可以了。检测点突变费时费力,成本比测序大的多。
2楼2013-01-07 17:44:52
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jasminezhao

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ccharlien at 2013-01-07 17:44:52
不需要再检测,直接测序就可以了。检测点突变费时费力,成本比测序大的多。

哦,那若果是用双酶切做的话,得到的克隆提质粒后是不是要进行双酶切检测,再送去测序啊??谢谢
3楼2013-01-07 20:56:57
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ccharlien

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by jasminezhao at 2013-01-07 20:56:57
哦,那若果是用双酶切做的话,得到的克隆提质粒后是不是要进行双酶切检测,再送去测序啊??谢谢...

双酶切做?你指的是普通的质粒构建么?
可以酶切也可以不切
我现在都不做酶切了直接测序的
如果克隆长的数量奇怪才会做酶切看一下
4楼2013-01-07 23:07:58
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