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zqt123_1981

木虫 (小有名气)

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专业: 果树学

[求助] 关于表达载体构建的酶切位点问题已有4人参与

各位大侠：
我最近要做植物表达载体构建，关于酶切位点的问题想请教各位，在设计目的基因开发阅读框的PCR引物是加入酶切位点的原则是什么?我的T载体及表达载体见图请各位指教，应该加入什么酶切位点

关于表达载体构建的酶切位点问题

image001.jpg

关于表达载体构建的酶切位点问题-1

image002.gif

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1楼 2014-08-06 16:52:08

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ncuduhan

银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-08-08 13:51:49

1 检查你的目的基因中的酶切位点要排除掉
2 尽量选择一下比较容易切的酶切位点效率高一点比较好

5楼2014-08-08 12:28:27

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馨-馨

银虫 (小有名气)

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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

你的PCR产物中间有什么酶切位点啊

2楼2014-08-06 22:02:48

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phytoman

银虫 (小有名气)

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专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-07 10:59:18

1、首先检查插入片段中包含哪些酶切位点
2、尽量选用酶切效率高的、没有星活性的限制性内切酶

3楼2014-08-06 23:06:31

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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

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专业: 病毒学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-08-07 10:59:40

T载体不表达，酶切位点跟T载体无关

4楼2014-08-07 09:16:34

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