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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 凝胶电泳检测到的真菌RNA是这个样子，是什么原因造成的？
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上

[求助] 凝胶电泳检测到的真菌RNA是这个样子，是什么原因造成的？ 已有4人参与

各位虫友们，最近一直在提真菌的RNA,最后凝胶电泳的结果是这个样子的，用的就是一般的琼脂糖凝胶电泳。
     我想知道，出现这个问题的原因是什么？要怎样做才能解决这个问题？
     麻烦路过的亲给点意见哦

凝胶电泳检测到的真菌RNA是这个样子，是什么原因造成的？
3.jpg
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
1楼 2014-07-31 16:57:05
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若溪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wu-ke-da(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-08-01 10:29:57
第三泳道和第五泳道的条带挺正常的，18s和28s条带比较清晰，5s量比较少，一般条带很弱，只有RNA降解了才会出现特别多的小条带或弥散带
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没有比脚更长的路，没有比人更高的山
2楼2014-08-01 08:29:40
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wu-ke-da(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-01 10:30:11
不完美，但谈不上糟糕：
1、无DNA污染；
2、有28S和18S条带，虽然比例不是很好；
3、有降解。

主要问题是防止降解，另外走电泳时上样量不需要那么多（那两个太强了，分辨效果不好），走的时间在长点，让28S和18S分得更开些。
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3楼2014-08-01 08:53:31
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wangling209

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
wu-ke-da(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:48:39
上样量稀释一下，浓度在200ng/微升的效果会好点，跑出的条带会更好看
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4楼2014-08-10 15:01:40
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangling209 at 2014-08-10 15:01:40
上样量稀释一下，浓度在200ng/微升的效果会好点，跑出的条带会更好看

非常感谢！
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
5楼2014-08-10 20:04:44
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
3楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-01 08:53:31
不完美，但谈不上糟糕：
1、无DNA污染；
2、有28S和18S条带，虽然比例不是很好；
3、有降解。

主要问题是防止降解，另外走电泳时上样量不需要那么多（那两个太强了，分辨效果不好），走的时间在长点，让28S和 ...

上样量一般是5ul 的样子，是要降低上样量，还是要降低上样量的浓度？5s的条带比较微弱可以吗？就现在这个样子能继续做反转录吗？
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
6楼2014-08-10 20:09:16
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
2楼: Originally posted by 若溪 at 2014-08-01 08:29:40
第三泳道和第五泳道的条带挺正常的，18s和28s条带比较清晰，5s量比较少，一般条带很弱，只有RNA降解了才会出现特别多的小条带或弥散带

谢谢。就目前的状态，可以继续做反转录吗？
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
7楼2014-08-10 20:09:50
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若溪

金虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by wu-ke-da at 2014-08-10 20:09:50
谢谢。就目前的状态，可以继续做反转录吗？...

可以
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没有比脚更长的路，没有比人更高的山
8楼2014-08-11 07:54:20
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竹子小小

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

明明很正常啊，楼主觉得哪里不对？
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9楼2014-08-12 09:59:42
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wu-ke-da

金虫 (小有名气)

学习的路上
引用回帖:
9楼: Originally posted by 竹子小小 at 2014-08-12 09:59:42
明明很正常啊，楼主觉得哪里不对？

感觉看不到5s的条带
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喜欢生物，所以想好好研究下去！
10楼2014-09-11 19:01:39
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