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weiyuanzheng铜虫 (小有名气)
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[求助]
关于RACE实验的巢式 PCR扩增
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| 各位老师，师兄师姐好。小虫最近在做RACE实验，之前已经拿到完整的ORF框，现在主要是为了获得两端序列。为什么nest PCR克隆到的片段和之前已测序的ORF总有个别碱基的差异，很是奇怪？难道是nest PCR出了问题，发生了碱基错配？还是由于第一轮PCR产物稀释的倍数不够，导致对nest PCR 有影响，使巢式PCR扩增收到啦影响？急切盼望知道，谢谢 |
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