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PCR条带问题 已有12人参与
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请问各位大神第一张图是什么情况？我是PCR完了跑胶的。为什么只有拖带没有目的条带呢？第二张图条带很淡要怎么样条带才能亮啊？ IMG_9737.JPG  IMG_9728.JPG |
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leonaliu2013
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3楼2014-07-20 19:34:54
【答案】应助回帖
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| 你上边的两个图均属于PCR条件没有摸清楚造成的目的基因没扩出来或扩的不多不理想。PCR的目的是扩增目的基因，以获得大量的目的产物进行下一步操作。为了高效获得目的产物，我们必须确定最佳的PCR条件，构建最合适的PCR体系。PCR体系包括：模板、引物、底物、酶、缓冲液、双蒸水。根据引物序列，推测出退火的最适温度，确定PCR反应参数，然后确定PCR体系应加的各成分的最适量。摸索PCR体系及参数时，我们使用的是小体系，如20μl。待条件确定后，再进行体系扩大，最好是体系不变，管数增加，这样有利于获得理想的结果，因为有时候单纯等体积扩大体系难以获得理想结果。 |
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