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godloveplum

金虫 (小有名气)

[求助] 基因全长克隆 已有4人参与

我想克隆基因的全长,但是我不知道基因全长的准确序列,只是有通过同源性比较基因组得出的假定的序列,用假定序列设计引物后,没有P出条带来,希望有经验的前辈能给予指点,不胜感激!
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Nothingisimpossibleforawillingheart!
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红尘客栈

木虫 (著名写手)


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币-1, 应助指数-1, 屏蔽内容, 抄袭 2014-07-13 19:21:28
本帖内容被屏蔽

3楼2014-07-13 15:13:03
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查看全部 14 个回答

冉兆星

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你用的难道不是模式生物吗?
2楼2014-07-13 14:52:23
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godloveplum

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 冉兆星 at 2014-07-13 14:52:23
你用的难道不是模式生物吗?

不是的
Nothingisimpossibleforawillingheart!
4楼2014-07-14 12:15:24
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青青草allan

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
godloveplum(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-24 09:56:50
godloveplum: 金币+3, 有帮助 2014-08-02 09:15:55
godloveplum: 金币+5, 有帮助 2014-08-02 09:17:39
先找到和你的实验标本亲缘关系较近的物种中该基因的全长,然后根据该基因全长设计引物,扩增出一个中间片段,然后根据你扩出的中间片段,分别设计3‘和5’RACE引物,用RACE试剂盒扩出3‘和5’端全长,最后拼接在一起得到该基因的全长。
爱出者爱返,福往者福来
5楼2014-07-15 14:28:30
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