24小时热门版块排行榜    

查看: 2574  |  回复: 11

一路向北14

金虫 (小有名气)

[求助] M13蓝白斑筛选出现了蓝斑和白斑? 已有4人参与

我在用JM109大肠杆菌作宿主,将M13mp18 RF I DNA通过化学转化的方法转入JM109中,于含有IPTG和X-gal的LB培养基上过夜培养,长出来了片状的蓝斑和点点状的白斑,想问一下虫友们,有没有做过类似的实验,帮忙分析和指导一下,谢谢!

M13蓝白斑筛选出现了蓝斑和白斑?
IMG_20140707_075850.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奔跑随风

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
一路向北14(dllchina代发): 金币+1, 鼓励应助 2014-07-08 22:01:08
你的应该是涂板没晾干,晾干之后就会是单个的单菌落,蓝色和白色的看的很清楚。
2楼2014-07-07 10:44:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

499649610

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+3, 鼓励新虫应助 2014-07-08 22:01:24
一路向北14: 金币+4 2014-07-12 09:23:02
看平板图片好像整个板都有菌存在,不知是否是图片问题,或者 可能存在污染或抗生素失效,涂板没涂均匀可能出现小块蓝斑,连接效率高,DNA多的话 是有可能基本不存在蓝斑,建议你可以把平板放冰箱4℃放个一天,假阳性的白斑往往会变为蓝斑,还有 个人人认为i可以重做一次 涂板 的菌液可适当减少,然后 最好涂匀,做个对照 看看效果
3楼2014-07-07 10:58:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱睡猪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
IPTG和X-gal没有涂匀,菌在少涂点,涂板水平要改善
ControlMyself
4楼2014-07-07 15:24:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一路向北14

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 499649610 at 2014-07-07 10:58:25
看平板图片好像整个板都有菌存在,不知是否是图片问题,或者 可能存在污染或抗生素失效,涂板没涂均匀可能出现小块蓝斑,连接效率高,DNA多的话 是有可能基本不存在蓝斑,建议你可以把平板放冰箱4℃放个一天,假阳性 ...

我要的是蓝斑。之前转化了两次,没有长出白斑,不知道这次怎么长出白斑了,还有蓝斑怎么成片的生长,而不是单菌落呢?
5楼2014-07-07 17:08:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一路向北14

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱睡猪 at 2014-07-07 15:24:27
IPTG和X-gal没有涂匀,菌在少涂点,涂板水平要改善

可能涂板水平真的不好,但是菌涂少点的话,会不会长不出来?
6楼2014-07-07 17:11:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

499649610

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 一路向北14 at 2014-07-07 17:08:58
我要的是蓝斑。之前转化了两次,没有长出白斑,不知道这次怎么长出白斑了,还有蓝斑怎么成片的生长,而不是单菌落呢?...

成片的涨 最通常的解释 就是涂板没涂好,或者说有抗生素失效导致,蓝斑的话不是说明是空载体么?怎么要蓝斑?
7楼2014-07-08 08:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一路向北14

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 499649610 at 2014-07-08 08:58:54
成片的涨 最通常的解释 就是涂板没涂好,或者说有抗生素失效导致,蓝斑的话不是说明是空载体么?怎么要蓝斑?...

我是将M13mp18 RF DNA转入到JM109大肠中的,所以我需要的是蓝斑,但是白斑我不知道是什么东西?就是蓝斑也好奇怪?
8楼2014-07-08 09:48:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leonaliu2013

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉是抗生素失效,不然不会出现这么高的转化效率。一般连接产物涂板,肯定会有单菌落。另外把板吹干一点再涂。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2014-07-08 10:26:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一路向北14

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by leonaliu2013 at 2014-07-08 10:26:03
感觉是抗生素失效,不然不会出现这么高的转化效率。一般连接产物涂板,肯定会有单菌落。另外把板吹干一点再涂。

我没有加抗生素
10楼2014-07-08 10:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 一路向北14 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 263求调剂 +4 yqdszhdap- 2026-03-22 4/200 2026-03-22 21:20 by 1144970272
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +11 梨花珞晚风 2026-03-17 11/550 2026-03-22 17:42 by luoyongfeng
[考研] 一志愿中南化学(0703)总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 324求调剂 +6 lucky呀呀呀鸭 2026-03-20 6/300 2026-03-22 16:01 by ColorlessPI
[考研] 280求调剂 +11 咕噜晓晓 2026-03-18 12/600 2026-03-21 22:40 by ACS Nano——
[考研] 广西大学材料导师推荐 +3 夏夏夏小正 2026-03-17 5/250 2026-03-21 22:20 by 金昊ML
[考研] 306求0703调剂一志愿华中师范 +5 纸鱼ly 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:11 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +9 简单点0 2026-03-17 9/450 2026-03-21 15:37 by lature00
[考研] 330求调剂 +4 小材化本科 2026-03-18 4/200 2026-03-20 23:13 by JourneyLucky
[考研] 一志愿吉林大学材料学硕321求调剂 +11 Ymlll 2026-03-18 15/750 2026-03-20 19:40 by 丁丁*
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +5 ioodiiij 2026-03-17 5/250 2026-03-19 18:22 by zcl123
[考研] 材料与化工求调剂 +7 为学666 2026-03-16 7/350 2026-03-19 14:48 by 尽舜尧1
[考研] 286求调剂 +6 lemonzzn 2026-03-16 10/500 2026-03-19 14:31 by lemonzzn
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 328求调剂,英语六级551,有科研经历 +4 生物工程调剂 2026-03-16 12/600 2026-03-19 11:10 by 生物工程调剂
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
信息提示
请填处理意见