24小时热门版块排行榜    

查看: 2588  |  回复: 11

一路向北14

金虫 (小有名气)

[求助] M13蓝白斑筛选出现了蓝斑和白斑? 已有4人参与

我在用JM109大肠杆菌作宿主,将M13mp18 RF I DNA通过化学转化的方法转入JM109中,于含有IPTG和X-gal的LB培养基上过夜培养,长出来了片状的蓝斑和点点状的白斑,想问一下虫友们,有没有做过类似的实验,帮忙分析和指导一下,谢谢!

M13蓝白斑筛选出现了蓝斑和白斑?
IMG_20140707_075850.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奔跑随风

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
一路向北14(dllchina代发): 金币+1, 鼓励应助 2014-07-08 22:01:08
你的应该是涂板没晾干,晾干之后就会是单个的单菌落,蓝色和白色的看的很清楚。
2楼2014-07-07 10:44:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

499649610

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dllchina: 金币+3, 鼓励新虫应助 2014-07-08 22:01:24
一路向北14: 金币+4 2014-07-12 09:23:02
看平板图片好像整个板都有菌存在,不知是否是图片问题,或者 可能存在污染或抗生素失效,涂板没涂均匀可能出现小块蓝斑,连接效率高,DNA多的话 是有可能基本不存在蓝斑,建议你可以把平板放冰箱4℃放个一天,假阳性的白斑往往会变为蓝斑,还有 个人人认为i可以重做一次 涂板 的菌液可适当减少,然后 最好涂匀,做个对照 看看效果
3楼2014-07-07 10:58:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

爱睡猪

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
IPTG和X-gal没有涂匀,菌在少涂点,涂板水平要改善
ControlMyself
4楼2014-07-07 15:24:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一路向北14

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 499649610 at 2014-07-07 10:58:25
看平板图片好像整个板都有菌存在,不知是否是图片问题,或者 可能存在污染或抗生素失效,涂板没涂均匀可能出现小块蓝斑,连接效率高,DNA多的话 是有可能基本不存在蓝斑,建议你可以把平板放冰箱4℃放个一天,假阳性 ...

我要的是蓝斑。之前转化了两次,没有长出白斑,不知道这次怎么长出白斑了,还有蓝斑怎么成片的生长,而不是单菌落呢?
5楼2014-07-07 17:08:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一路向北14

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 爱睡猪 at 2014-07-07 15:24:27
IPTG和X-gal没有涂匀,菌在少涂点,涂板水平要改善

可能涂板水平真的不好,但是菌涂少点的话,会不会长不出来?
6楼2014-07-07 17:11:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

499649610

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 一路向北14 at 2014-07-07 17:08:58
我要的是蓝斑。之前转化了两次,没有长出白斑,不知道这次怎么长出白斑了,还有蓝斑怎么成片的生长,而不是单菌落呢?...

成片的涨 最通常的解释 就是涂板没涂好,或者说有抗生素失效导致,蓝斑的话不是说明是空载体么?怎么要蓝斑?
7楼2014-07-08 08:58:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一路向北14

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 499649610 at 2014-07-08 08:58:54
成片的涨 最通常的解释 就是涂板没涂好,或者说有抗生素失效导致,蓝斑的话不是说明是空载体么?怎么要蓝斑?...

我是将M13mp18 RF DNA转入到JM109大肠中的,所以我需要的是蓝斑,但是白斑我不知道是什么东西?就是蓝斑也好奇怪?
8楼2014-07-08 09:48:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

leonaliu2013

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉是抗生素失效,不然不会出现这么高的转化效率。一般连接产物涂板,肯定会有单菌落。另外把板吹干一点再涂。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2014-07-08 10:26:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

一路向北14

金虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by leonaliu2013 at 2014-07-08 10:26:03
感觉是抗生素失效,不然不会出现这么高的转化效率。一般连接产物涂板,肯定会有单菌落。另外把板吹干一点再涂。

我没有加抗生素
10楼2014-07-08 10:53:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 一路向北14 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 336化工调剂 +3 王大坦1 2026-03-23 4/200 2026-03-23 11:07 by laoshidan
[考研] 085600材料与化工 +10 安全上岸! 2026-03-16 10/500 2026-03-23 09:31 by Jy?
[考研] 352求调剂 +3 大米饭! 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123!
[考研] 310求调剂 +4 baibai1314 2026-03-16 4/200 2026-03-22 20:19 by edmund7
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +3 jiajunX 2026-03-22 3/150 2026-03-22 19:32 by brblmd
[考研] 289材料与化工(085600)B区求调剂 +3 这么名字咋样 2026-03-22 4/200 2026-03-22 17:56 by 云民大李老师
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 生物学一志愿985,分数349求调剂 +4 zxts12 2026-03-21 7/350 2026-03-22 09:57 by zxts12
[基金申请] 山东省面上项目限额评审 +4 石瑞0426 2026-03-19 4/200 2026-03-22 08:50 by Wei_ren
[考研] 279分求调剂 一志愿211 +14 chaojifeixia 2026-03-19 15/750 2026-03-21 13:24 by zhukairuo
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 一志愿武理材料305分求调剂 +6 想上岸的鲤鱼 2026-03-18 7/350 2026-03-21 01:03 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西南交大,求调剂 +5 材化逐梦人 2026-03-18 5/250 2026-03-21 00:26 by JourneyLucky
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[论文投稿] 申请回稿延期一个月,编辑同意了。但系统上的时间没变,给编辑又写邮件了,没回复 10+3 wangf9518 2026-03-17 4/200 2026-03-19 23:55 by babero
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 材料,纺织,生物(0856、0710),化学招生啦 +3 Eember. 2026-03-17 9/450 2026-03-18 10:28 by Eember.
[考研] 有没有道铁/土木的想调剂南林,给自己招师弟中~ +3 TqlXswl 2026-03-16 7/350 2026-03-17 15:23 by TqlXswl
信息提示
请填处理意见