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韩元富豪

金虫 (小有名气)

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[求助] 质粒上的两个酶切位点紧挨着，双酶切能否切开已有4人参与

我的质粒上的两个酶切位点是Pst I （平末端）和 Sma I（粘性末端），两个位点是紧挨着，酶是Thermo 的酶，Buffer 是通用性的，双酶切能切开吗，不过不能，怎样做才能切开呀

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1楼 2014-07-06 12:10:54

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gangnoon

铜虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

个人觉得，用NEB的酶切过夜，是可以切开的。我曾经一个8K的片段，双酶切位点间只有20几个Kb，我同时单双酶切过夜后再连接，然后测序，OK

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