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【求助/交流】相邻酶切位点的双酶切
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liuwei78
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[交流]
【求助/交流】相邻酶切位点的双酶切
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两个酶切位点相邻,没有重叠。若是双酶切,然后胶回收,会不会影响酶切位点以及后续的连接实验呢?该注意些什么问题?请大家帮忙。
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2010-12-14 19:06:10
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duanming123
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是空载体么,应该没问题吧
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2010-12-14 19:38:34
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waiwaidou_1983
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rainwander(金币+5):没问题... ...鼓励以后积极参与~~~ 2010-12-14 21:22:40
没问题,多克隆位点上的都可以用,设计MCS的时候都考虑到了
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3楼
2010-12-14 21:19:03
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xuexue1204
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我也是做的这个,是空的表达载体,两个酶切位点紧挨着,有人建议先切一端,再切另一端,不过我还没做呢,如果你做的话,麻烦分享下经验,谢谢
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2010-12-14 22:33:16
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xuexue1204
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两个酶切位点离得太近的话,那两个酶能同时附到载体质粒上吗?
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5楼
2010-12-14 22:34:53
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gundamba
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两个酶切位点至少要有5bp以上的距离,不要选离得太近的,否则很难双酶切成功
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2010-12-14 22:51:57
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lxj341401
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靠得太近有空间位阻的,影响酶切效果,为了保证酶切效果建议采用分两次单酶切。
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7楼
2011-12-20 22:43:36
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xl_dut
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如果是设计的引物中包含紧邻的双酶切位点,是否会存在切不开的问题呢?可以补救吗?同求助各位虫友!
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一日之计在于昨天!
8楼
2013-04-27 16:58:39
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