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liuwei78

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】相邻酶切位点的双酶切 已有6人参与

两个酶切位点相邻,没有重叠。若是双酶切,然后胶回收,会不会影响酶切位点以及后续的连接实验呢?该注意些什么问题?请大家帮忙。
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duanming123

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
是空载体么,应该没问题吧
2楼2010-12-14 19:38:34
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waiwaidou_1983

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
rainwander(金币+5):没问题... ...鼓励以后积极参与~~~ 2010-12-14 21:22:40
没问题,多克隆位点上的都可以用,设计MCS的时候都考虑到了
3楼2010-12-14 21:19:03
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我也是做的这个,是空的表达载体,两个酶切位点紧挨着,有人建议先切一端,再切另一端,不过我还没做呢,如果你做的话,麻烦分享下经验,谢谢
共同学习,共同进步,共同提高,加油!
4楼2010-12-14 22:33:16
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)

两个酶切位点离得太近的话,那两个酶能同时附到载体质粒上吗?
共同学习,共同进步,共同提高,加油!
5楼2010-12-14 22:34:53
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gundamba

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
两个酶切位点至少要有5bp以上的距离,不要选离得太近的,否则很难双酶切成功
6楼2010-12-14 22:51:57
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
靠得太近有空间位阻的,影响酶切效果,为了保证酶切效果建议采用分两次单酶切。
7楼2011-12-20 22:43:36
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xl_dut

木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如果是设计的引物中包含紧邻的双酶切位点,是否会存在切不开的问题呢?可以补救吗?同求助各位虫友!
一日之计在于昨天!
8楼2013-04-27 16:58:39
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