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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】相邻酶切位点的双酶切
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liuwei78

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】相邻酶切位点的双酶切 已有6人参与

两个酶切位点相邻，没有重叠。若是双酶切，然后胶回收，会不会影响酶切位点以及后续的连接实验呢？该注意些什么问题？请大家帮忙。
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1楼 2010-12-14 19:06:10
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duanming123

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
是空载体么，应该没问题吧
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2楼2010-12-14 19:38:34
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waiwaidou_1983

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
rainwander(金币+5):没问题... ...鼓励以后积极参与~~~ 2010-12-14 21:22:40
没问题，多克隆位点上的都可以用，设计MCS的时候都考虑到了
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3楼2010-12-14 21:19:03
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我也是做的这个，是空的表达载体，两个酶切位点紧挨着，有人建议先切一端，再切另一端，不过我还没做呢，如果你做的话，麻烦分享下经验，谢谢
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共同学习，共同进步，共同提高，加油！
4楼2010-12-14 22:33:16
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xuexue1204

铜虫 (小有名气)
两个酶切位点离得太近的话，那两个酶能同时附到载体质粒上吗？
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共同学习，共同进步，共同提高，加油！
5楼2010-12-14 22:34:53
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gundamba

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
两个酶切位点至少要有5bp以上的距离，不要选离得太近的，否则很难双酶切成功
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6楼2010-12-14 22:51:57
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
靠得太近有空间位阻的，影响酶切效果，为了保证酶切效果建议采用分两次单酶切。
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7楼2011-12-20 22:43:36
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xl_dut

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果是设计的引物中包含紧邻的双酶切位点，是否会存在切不开的问题呢？可以补救吗？同求助各位虫友！
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一日之计在于昨天！
8楼2013-04-27 16:58:39
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