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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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韩元富豪

金虫 (小有名气)

[求助] 我的目的基因上添加的两个酶切位点和T载体上的酶切位点相同,怎么办 已有1人参与

1.我的目的基因上添加的两个酶切位点和T载体上的酶切位点相同,怎么办i
添加的酶切位点是HindIII和Kpn I,
2.我想不构建克隆载体,直接构建表达载体,所以想PCR完后,不进行TA克隆,我用的是Thermo 的酶,我想问一下,载体和PCR片段双酶切后,用连接酶连起来,25℃,3h后,是直接涂板呢,还是跑电泳,跑电泳我怎么看不着条带(我们的凝胶成像仪只能用肉眼看),是不是连接完后,直接涂抗性板子
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stone2239

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
韩元富豪(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-06 17:46:28
1.你的PCR产物可以连到连到T-simple载体上,这个上面没有多克隆位点
2.PCR产物也可以直接双酶切连接转化后涂板,不需要跑电泳
2楼2014-07-06 10:54:35
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