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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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hshzhq

铜虫 (正式写手)


[交流] 如何从已知细胞中P出某个基因,并加上酶切位点?

现在分子实验开始的基因获取主要有两种:1、购买含有目的基因的载体,这个需要花钱;2、直接从已知表达细胞里面P出该基因。这次命题以第二种为目的,以human的Actin基因为目标,请设计P出该基因的引物,需要解释清楚引物的位置和设计特点,两端的酶切位点可以由各会员随意设计两个不同的酶切系列即可。
    希望各回答会员能解释一下设计的特点和原理。
    提示:需要将大部分序列给出。
序列信息参见:http://www.ncbi.nlm.nih.gov/nuccore/NM_001100.3
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)



hshzhq(金币+1):谢谢参与
小丹木木(金币+2): 鼓励回帖,情人节快乐! 2012-02-14 10:41:52
Actin是砍价基因,在两端设计好引物后,从绝大多数细胞(组织中都可以扩增出来的。引物的设计根据所需片段的大小和所需的片段位置来定。一般做内参并无此项要求,但不知你指的是什么。
2楼2012-02-14 08:45:10
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)


纠正笔误:砍价=看家
3楼2012-02-14 08:45:48
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imyting

至尊木虫 (正式写手)



hshzhq(金币+1):谢谢参与
引物最好自己设计,借别人之手不是长远之计,各种设计原则论坛中多得很。
4楼2012-02-14 11:14:16
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wangleimin

木虫 (正式写手)



hshzhq(金币+1):谢谢参与
学习中
5楼2012-02-14 12:05:22
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hshzhq

铜虫 (正式写手)


都是群自己都不会的人在回复,浪费金币
6楼2012-02-14 13:34:45
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hshzhq

铜虫 (正式写手)


引用回帖:
: Originally posted by exon2002 at 2012-02-14 08:45:10:
Actin是砍价基因,在两端设计好引物后,从绝大多数细胞(组织中都可以扩增出来的。引物的设计根据所需片段的大小和所需的片段位置来定。一般做内参并无此项要求,但不知你指的是什么。

你只需要设计出引物,需要在引物中添加酶切位点序列。只需要能将该基因在DNA基因组中提取出来就是了。
7楼2012-02-14 13:36:18
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
内容已删除
8楼2012-02-15 07:05:15
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7788945

银虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
LZ是要考考大家?
9楼2012-02-15 18:39:21
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