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huahua806341

新虫 (初入文坛)

[求助] 培养细胞中乳酸和氨

在细胞培养过程中 乳酸和氨的含量是判断细胞生长情况的标志之二,但是通过它们的积累量究竟可以看出什么 可以判断出什么 怎么判断?
另外,我还发现,培养完细胞的培养基放置几天后,乳酸值会增高,这是怎么回事?
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缺友情

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此漂已死,有事烧纸 4-8

优秀版主

★ ★ ★
看天: 金币+3, 鼓励交流 2012-03-28 21:10:25
引用回帖:
5楼: Originally posted by huahua806341 at 2012-03-27 18:14:55:
反映的是细胞怎样的一种状态,我们使用的是乳酸检测盒,乳酸值越高能反映细胞越多或者细胞的状态越好吗?

你可以先看看文献,了解你所培养的细胞的代谢途径,根据乳酸所处的代谢地位来判定该细胞的状态。如果是正常代谢下就是产生乳酸或者乳酸是正常代谢的中间产物,那应该是表明细胞比较活跃,代谢正常,而要是其正常条件下不会产生乳酸,只有在特殊条件下才产生乳酸的话,那应该就是说细胞处于被胁迫的状态了~
具体还是要根据你的培养条件和细胞特性来定的吧

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有些累了,淡了,该去了~
6楼2012-03-27 18:22:51
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缺友情

荣誉版主 (文学泰斗)

此漂已死,有事烧纸 4-8

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【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
乳酸和氨主要是代谢产物。通过测定代谢产物可以了解细胞的生长情况的

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有些累了,淡了,该去了~
4楼2012-03-27 14:54:22
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sengyuhu

铜虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
我做的是CHO细胞,一般在对数生长期乳酸和氨都快速累积,进入稳定期后其浓度基本不再增加。有些细胞系可能在培养后期把乳酸吃掉(将乳酸作为碳源利用),这是比较理想的状态。

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挥一挥衣袖,不带走一片云彩
8楼2012-03-28 17:22:05
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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zhaohq1209: 金币+1, 鼓励回帖鼓励交流哈 2012-03-26 23:11:41
你确定一定是乳酸吗?我觉得是酸性物质更准确吧,这是细胞代谢时产生的一些物质呈酸性的结果,一般培养基的颜色会发生变化就是这个造成的。

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2楼2012-03-26 19:07:49
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huahua806341

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肖颖2009 at 2012-03-26 19:07:49:
你确定一定是乳酸吗?我觉得是酸性物质更准确吧,这是细胞代谢时产生的一些物质呈酸性的结果,一般培养基的颜色会发生变化就是这个造成的。

我使用的乳酸检测试剂盒测得
3楼2012-03-26 20:35:51
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huahua806341

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by 缺友情 at 2012-03-27 14:54:22:
乳酸和氨主要是代谢产物。通过测定代谢产物可以了解细胞的生长情况的

反映的是细胞怎样的一种状态,我们使用的是乳酸检测盒,乳酸值越高能反映细胞越多或者细胞的状态越好吗?
5楼2012-03-27 18:14:55
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huahua806341

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 缺友情 at 2012-03-27 18:22:51:
你可以先看看文献,了解你所培养的细胞的代谢途径,根据乳酸所处的代谢地位来判定该细胞的状态。如果是正常代谢下就是产生乳酸或者乳酸是正常代谢的中间产物,那应该是表明细胞比较活跃,代谢正常,而要是其正常 ...

呵呵,谢谢您!
7楼2012-03-27 18:29:56
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huahua806341

新虫 (初入文坛)

送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by sengyuhu at 2012-03-28 17:22:05:
我做的是CHO细胞,一般在对数生长期乳酸和氨都快速累积,进入稳定期后其浓度基本不再增加。有些细胞系可能在培养后期把乳酸吃掉(将乳酸作为碳源利用),这是比较理想的状态。

sengyuhu,您好,我做的也是CHO细胞,最近检测发现细胞很多,但乳酸值很低,这种情况说明细胞代谢状况不好吗?还有,CHO细胞目前不再全是规则的梭形,不论细胞长的满不满都会有圆形未伸展开的细胞。这是怎么导致的,有改善的方法吗?您可以看看这个图,http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=4269842,谢谢!
9楼2012-03-28 18:37:06
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sengyuhu

铜虫 (小有名气)

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引用回帖:
9楼: Originally posted by huahua806341 at 2012-03-28 18:37:06:
sengyuhu,您好,我做的也是CHO细胞,最近检测发现细胞很多,但乳酸值很低,这种情况说明细胞代谢状况不好吗?还有,CHO细胞目前不再全是规则的梭形,不论细胞长的满不满都会有圆形未伸展开的细胞。这是怎么导致 ...

对我们来说,乳酸越低说明细胞的代谢状态良好,在稳定期以后能够维持更长时间。(但也不能只是凭这一个参数来判断,是不是可以跟你以前的数据比较下,看看乳酸浓度跟细胞状态有没有关联)
我养的都是驯化到悬浮培养的CHO细胞,所以对你的贴壁CHO细胞梭形与圆形的问题不太了解,但我养过的悬浮细胞在有时会发生一定的贴壁现象。
我不是很了解细胞贴壁的过程,个人感觉出现圆形细胞可能跟你的细胞生长变快有点关系,细胞生长可能随着代次的增加越来越快。
挥一挥衣袖,不带走一片云彩
10楼2012-03-30 09:30:14
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