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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 海马细胞培养中，B27和谷氨酰胺的量必须十分精确吗？
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zhanggxfly

金虫 (小有名气)

[求助] 海马细胞培养中，B27和谷氨酰胺的量必须十分精确吗？

我是新手，培养仔鼠神经细胞。用到的Neur Basal培养基中需要加入B27，本来是50mlNB，加入1ml B27的，可是我在分装10ml的B27时，却分成了11管，怎么办啊？怎么用啊？会影响细胞的生长吗？把B27全都扔了是不现实的，毕竟B27太贵了啊。

还有，在加入谷氨酰胺时，没有注意谷氨酰胺已经有沉淀了，仍然是吸了原来的清夜加入到NB培养基中，这样配出来的培养基还能用吗？

恳请解答！
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我想不断进步
1楼 2011-05-06 09:32:11
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zhanggxfly

金虫 (小有名气)
我买的是500ml装的Neur basal培养基，每次使用前倒出50ml入玻璃瓶 ，加入B27 1ml，再加入谷氨酰胺200ul，就配成可以直接使用的培养基了。
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我想不断进步
2楼2011-05-06 10:02:18
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weizhongya

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

zhanggxfly(金币+2): 谢谢回帖 2011-05-06 11:58:01
引用回帖:
Originally posted by zhanggxfly at 2011-05-06 09:32:11:
我是新手，培养仔鼠神经细胞。用到的Neur Basal培养基中需要加入B27，本来是50mlNB，加入1ml B27的，可是我在分装10ml的B27时，却分成了11管，怎么办啊？怎么用啊？会影响细胞的生长吗？把B27全都扔了是不现实的， ...

呵呵 分装多了 一般是你分的有问题啊 一般会有总液体少些 分的过程会有损耗，回头看看是不是枪的问题 分好的每管是不是不足1ml  如果这样 你就好好吸入1ml  至于谷氨酰胺 最好每次最好少配点 每次用之前 必须等化开后 完全溶解 你可以试试看 用别人没有问题的 做个对照
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3楼2011-05-06 11:20:06
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zhanggxfly

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by weizhongya at 2011-05-06 11:20:06:
呵呵 分装多了 一般是你分的有问题啊 一般会有总液体少些 分的过程会有损耗，回头看看是不是枪的问题 分好的每管是不是不足1ml  如果这样 你就好好吸入1ml  至于谷氨酰胺 最好每次最好少配点 每次用之前 必须等 ...

我试过了，的确是不足1ml了，可是都分装完了才发现自己的失误，B27不能反复冻融的啊，我这样使用不足1ml的B27，会影响细胞生长吗？
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我想不断进步
4楼2011-05-06 12:03:27
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weizhongya

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by zhanggxfly at 2011-05-06 12:03:27:
我试过了，的确是不足1ml了，可是都分装完了才发现自己的失误，B27不能反复冻融的啊，我这样使用不足1ml的B27，会影响细胞生长吗？

拿出来后 就不要再冻了 放在四度 尽快用完 一般不要超过两周 应该没问题的
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5楼2011-05-06 12:42:43
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lstt09nk(金币+5): 辛苦~~ 2011-05-06 18:18:46
zhanggxfly(金币+3): 很有帮助~~非常感谢 2011-05-07 19:38:41
引用回帖:
Originally posted by zhanggxfly at 2011-05-06 09:32:11:
我是新手，培养仔鼠神经细胞。用到的Neur Basal培养基中需要加入B27，本来是50mlNB，加入1ml B27的，可是我在分装10ml的B27时，却分成了11管，怎么办啊？怎么用啊？会影响细胞的生长吗？把B27全都扔了是不现实的， ...

1.分装的时候多出来是很正常的
  考虑到连续取样的时候多多少少会有点误差的；
2.你可以第一次解冻两管，然后去1ml，余下的先放4度，下次换液的时候就解冻一管B27，先紧着开始解冻的那关用完，在补足1ML，一次类推就可以了；
3.谷氨酰胺的量是要尽量精确的，因为涉及细胞摄取的问题了，但是啦
要是不是特别精确的话，细胞也一样生存，就是可能需要换液要更频繁点就可以的啦
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
6楼2011-05-06 15:20:21
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