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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】培养细胞遇到的一些问题
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生

[交流] 【求助/交流】培养细胞遇到的一些问题 已有2人参与

各位大侠：近期小弟培养细胞时出现染菌现象，细菌为丝状，缠结在一起，肉眼看像小团棉花，它不会使细胞死亡，但会影响细胞生长状态。培养基中加了双抗，似乎不起作用。以前出现在培养箱的水盘中，前几个月出现在培养瓶中了。房间，培养箱等所有的设备都消毒了，重头复苏，还是会出现这种现象。有没有谁遇到过这种情况的，或者有解决办法的，帮小弟一把，金币重奖！谢谢各位了！
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1楼 2010-10-27 11:06:04
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kxxin66

金虫 (小有名气)
骑着蜗牛追火箭(金币+5):谢谢 2010-10-27 11:29:48
是霉菌污染的，用酒精消毒不太行的，我们都是擦拭完后再用火烤，尤其是注意培养箱的进气管道。祝你好运！
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2楼2010-10-27 11:13:18
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生
顶出来！
有没有人知道呢？
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3楼2010-10-27 14:31:55
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asd564244481

铜虫 (小有名气)
骑着蜗牛追火箭(金币+5):谢谢，看来很让人头疼啊 2010-10-27 17:39:18
二楼说的对，有可能是霉菌感染，如果你的灭菌处理没有起作用的话，我想很可能这种霉菌（真菌）是能产生孢子的。我现在也在做真菌方面的实验，由于孢子的存在，使得倒了培养基的培养皿很容易被不知道哪来的真菌孢子感染，而且很难根治。所以我建议你对培养箱灭菌的时候，尽量用火焰灼烧，这样才能有效果。
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冰冻三尺非一日之寒，滴水穿石非一日之功！
4楼2010-10-27 16:29:05
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
骑着蜗牛追火箭(金币+5):谢谢，我试试 2010-10-27 17:39:54
霉菌污染双抗是没有的（PS只针对细菌）。得两性霉素等抑制真菌抗生素才能控制住霉菌污染，建议用PBS或75酒精洗涤细胞后同时加大PS和两性霉素（或其它抑制真菌的抗生素）至5-10倍处理24-72小时后，期间可以多次洗涤。然后恢复正常观察细胞。
不行就把细胞仍了吧。
培养箱用自带的灭菌程序灭菌一次吧。
水盘75酒精擦拭后，倒点95酒精点火烧一下
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青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
5楼2010-10-27 16:33:22
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chengyuan7266

金虫 (小有名气)
骑着蜗牛追火箭(金币+2):这也有可能 2010-10-27 17:40:25
可能和天气原因有关吧，在秋天做细胞培养一般都是容易染菌的，也可能和你自身的操作方法有关。
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我是码农
6楼2010-10-27 16:50:32
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生
又沉了，出来
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7楼2010-10-27 20:03:32
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baigang888

金虫 (正式写手)
和天气原因有关
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自信、成功
8楼2010-10-27 20:32:49
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sophiemyn

木虫 (著名写手)
骑着蜗牛追火箭(金币+5):谢谢 2010-10-27 22:01:27
材料的原因，要是外植体，一定要保证灭菌干净了，现在都用的是次氯酸钠吧，设计时间梯度，找到最好时间；第二个就是超净工作台中，你的操作了，操作不难，但是细节很重要，有一点，不要让任何东西飘过你的培养皿上方。
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9楼2010-10-27 20:58:28
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骑着蜗牛追火箭

木虫 (著名写手)

纳米小生
再顶出来
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10楼2010-10-28 10:31:29
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