【求助/交流】细胞培养的问题 - 分子生物 - 综合其他

xiaomi1208

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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-07-10 08:14:11

应该没有污染吧只要不污染的话应该可以长好的还有培养基是含多少血清啊血清低了也会影响细胞生长此外培养基配制了多久啊时间长了谷氨酰胺会降解

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2楼2010-07-09 23:31:44

zhouyinggyf

金虫 (正式写手)

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确定用的培养基是正确的吧鸡胚细胞不好养吧

3楼2010-07-10 01:21:12

dianaofyezi

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dhd997(金币+1):有这个可能，细胞密度小，影响很大。 2010-07-10 11:29:07

这种细胞是应该可以传代的。是不是传代的时候密度小了？不知道你说原来是好好的是指什么样的原来呢？

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52187644

4楼2010-07-10 10:08:45

xingxing342

银虫 (小有名气)

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细胞状态不好，生长不起来了，你以前养好得也是这个细胞吗

5楼2010-07-15 14:34:37

Rubisco580

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是不是培养基里面少一些东西？或者是什么生长因子之类的。没养过这个不敢下结论。

6楼2010-07-15 16:40:06

小懒孩儿

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先测一下培养液的PH值看看我养的是其他的细胞但是之前也出现过类似的情况就是培养液时间长了一般培养液超过八九天就不行了

7楼2010-07-15 21:35:39

矿物油

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可能和合培养细胞的密度有关，调整一下细胞密度试试。

8楼2010-07-16 07:53:58

赵啦啦

新虫 (初入文坛)

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Propagation:    T
he base medium for this cell line is  Dulbecco's Modified Eagle's Medium. To make the complete growth medium, add thefetal bovine serum to a final concentration of 10%.
Temperature: 39.0°C; (Max. 40.0 °C, Min. 38.0°C)
Subculturing  Protocol:
Remove and discard culture medium.
Briefly rinse the cell layer with 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA solution to remove all traces of serum that contains trypsin inhibitor.
Add 2.0 to 3.0 ml of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes).
Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting for the cells to detach. Cells that are difficult to detach may be placed at 39°C to facilitate dispersal.
Add 6.0 to 8.0 ml of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.
Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels.
Incubate cultures at 39°C.

Subcultivation Ratio: A subcultivation ratio of 1:2 to 1:10 is recommended
Medium Renewal: Twice per week

9楼2010-07-20 16:50:04

日子妞儿

新虫 (初入文坛)

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换一种血清就好了
我之前遇到过

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我是黑妞儿哈哈

10楼2014-11-17 13:28:12