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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于MCF-7细胞培养的问题
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马龙sweeting

木虫 (正式写手)

[求助] 关于MCF-7细胞培养的问题

请问各位，我最近在培养MCF-7,可是这次传代后细胞3天了贴壁很少，细胞生长状况较差，培养液颜色仍然很红，漂浮细胞较多，并未发现染菌情况，怀疑是离心后放置时间太长。请问离心后细胞能放置在离心管里一段时间吗，这样会影响细胞活性吗~~
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1楼2011-08-20 20:09:35
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

procyte

新虫 (初入文坛)
乳腺癌类细胞比较挑剔血清质量，如用最好的血清还是要筛选下。我们筛选过几种，个人意见不对处希望大家指正。如有常年培养这株细胞的，可PM我
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11楼2015-04-10 00:49:19
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普通回帖

l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

马龙sweeting(金币+1): 我市将离心后的沉淀连着培养液一起放置的，放了十几分钟，发现细胞活力下降，几乎都死了，是因为这个原因吗 2011-08-20 21:03:58
离心后若想放置，需PBS或培养基悬浮，置于培养箱或冰上，可放置一天以内。最好PBS或培养基添加5%血清。如果将离心后的细胞沉淀放置，细胞数小时内就会活力下降，甚至死亡。
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2楼2011-08-20 20:15:22
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l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

马龙sweeting(金币+1): 谢谢啊~~我的细胞是沉淀完没有进行悬浮也没有将培养液吸出，这样也没事儿吗？ 2011-08-21 09:03:38
按你所说的，癌细胞沉淀悬浮于培养基中，常温情况下放两三个小时是肯定不会死亡的。建议检查收集细胞前的生长状态。若良好的话，检查酶消化时是否过度消化，吹打是否用力过大，还有就是离心转速控制在一千转以内。这个细胞我养过很久，只要控制好这几个步骤，不会出现你说的这个问题的。再就是这个细胞比较难消化，难以控制消化时间和程度，估计问题就出在这一步了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2011-08-20 22:52:03
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l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
adslye(金币+5): 感谢应助，三篇一起奖励~祝顺利！ 2011-08-21 09:36:09
这个细胞沉淀要吹打成细胞悬液，于培养液中才可以生存。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2011-08-21 09:13:34
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guifang

铁杆木虫 (小有名气)
一般来说，MCF-7细胞被公认为不是很好养的癌细胞之一，所以你这种情况比较正常，像中科院细胞库的话，用的血清是从德国进口的，所以这种细胞对血清的要求比较高，建议你换用进口胎牛血清试试。
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5楼2011-11-02 11:21:31
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Rubisco580

金虫 (小有名气)
楼主的培养液颜色很红？那是不是培养基太碱了？培养基过碱对细胞的损伤是很厉害的。
离心的时候放置一会是没事的，楼主放了多久？你要想放一会又不处理的话，还是放培养箱里面保温吧。放在室温时间长了不好。
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6楼2011-11-02 17:04:51
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myth134

金虫 (正式写手)
嗯，离心放一会没事的，我们也养了 好像挺好的啊，看是不是你培养基的问题哦～
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唯有读书高唯有考研大~
7楼2012-05-20 23:31:40
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wangyanzix

新虫 (初入文坛)
我也在养MCF-7细胞，刚开始养，用DMEM+10%四季青血清+10μg/ml胰岛素+1%双抗，长得很慢，传代后死了很多；再就是胰酶很难消化，吹打也不好吹得太散，怎么吹都有小团在。请各位帮我分析下原因，怎样才能养好这个细胞。
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8楼2012-11-12 09:50:44
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亚玄轩

铜虫 (小有名气)
我也在养，血清是进口胎牛血清，还好，望多交流
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9楼2012-11-15 09:36:57
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乔丹希尔

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by l-c-l at 2011-08-20 20:15:22
离心后若想放置，需PBS或培养基悬浮，置于培养箱或冰上，可放置一天以内。最好PBS或培养基添加5%血清。如果将离心后的细胞沉淀放置，细胞数小时内就会活力下降，甚至死亡。

那这个细胞的培养基的ph值是多少呢？
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愿结交更多志同道合的人一块前行！！
10楼2014-04-17 22:03:04
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