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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于MCF-7细胞培养的问题
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马龙sweeting

木虫 (正式写手)

[求助] 关于MCF-7细胞培养的问题

请问各位，我最近在培养MCF-7,可是这次传代后细胞3天了贴壁很少，细胞生长状况较差，培养液颜色仍然很红，漂浮细胞较多，并未发现染菌情况，怀疑是离心后放置时间太长。请问离心后细胞能放置在离心管里一段时间吗，这样会影响细胞活性吗~~
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1楼 2011-08-20 20:09:35
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wangyanzix

新虫 (初入文坛)
我也在养MCF-7细胞，刚开始养，用DMEM+10%四季青血清+10μg/ml胰岛素+1%双抗，长得很慢，传代后死了很多；再就是胰酶很难消化，吹打也不好吹得太散，怎么吹都有小团在。请各位帮我分析下原因，怎样才能养好这个细胞。
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8楼2012-11-12 09:50:44
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l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

马龙sweeting(金币+1): 我市将离心后的沉淀连着培养液一起放置的，放了十几分钟，发现细胞活力下降，几乎都死了，是因为这个原因吗 2011-08-20 21:03:58
离心后若想放置，需PBS或培养基悬浮，置于培养箱或冰上，可放置一天以内。最好PBS或培养基添加5%血清。如果将离心后的细胞沉淀放置，细胞数小时内就会活力下降，甚至死亡。
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2楼2011-08-20 20:15:22
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l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

马龙sweeting(金币+1): 谢谢啊~~我的细胞是沉淀完没有进行悬浮也没有将培养液吸出，这样也没事儿吗？ 2011-08-21 09:03:38
按你所说的，癌细胞沉淀悬浮于培养基中，常温情况下放两三个小时是肯定不会死亡的。建议检查收集细胞前的生长状态。若良好的话，检查酶消化时是否过度消化，吹打是否用力过大，还有就是离心转速控制在一千转以内。这个细胞我养过很久，只要控制好这几个步骤，不会出现你说的这个问题的。再就是这个细胞比较难消化，难以控制消化时间和程度，估计问题就出在这一步了。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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3楼2011-08-20 22:52:03
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l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
adslye(金币+5): 感谢应助，三篇一起奖励~祝顺利！ 2011-08-21 09:36:09
这个细胞沉淀要吹打成细胞悬液，于培养液中才可以生存。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2011-08-21 09:13:34
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