| 查看: 3890 | 回复: 10 | ||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | ||
zxzhouwhu铜虫 (初入文坛)
|
[求助]
MCF-10A细胞消化问题请教，谢谢！
|
|
| 培养人正常乳腺细胞MCF-10A，发现非常难消化下来，我用的是胰酶+EDTA的消化液，都消化快30分钟啦，还是吹大不下来，不知道大家有养过这个细胞的没有，有什么经验？非常感谢，急切等待大家回复！ |
回复此楼» 猜你喜欢
今天系统多次维护，明天很可能放榜！
已经有5人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有74人回复
-
岩土工程学报什么时候才能终审完呐
已经有4人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有25人回复
-
2027广东省杰青
已经有6人回复
-
快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。
已经有3人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有9人回复
-
咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否
已经有26人回复
-
我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人
已经有16人回复
-
有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验）
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教第一作者和通讯作者的相关问题，谢谢！
已经有15人回复
- 想考研，想请教大家几个问题，谢谢了。
已经有9人回复
- 用硝酸和高氯酸消化食品中铅相关问题，谢谢！
已经有9人回复
- 关于MCF-7细胞培养的问题
已经有12人回复
- 我是新手想请教一个关于细胞铺板的问题
已经有4人回复
- 【求助/交流】请教一个制备感受态细胞中的问题
已经有10人回复
- 【求助】急急急，邀请函不合适，三个问题请教各位！谢谢
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教关于几株人源白血病细胞的培养问题！！
已经有5人回复
- 【求助/交流】细胞铺板问题请教！！
已经有16人回复
- 【求助/交流】细胞传代时，胰酶消化的问题！
已经有7人回复
- 【请教】请教纳米粒子进入细胞核的问题
已经有15人回复
lw582482481
铜虫 (初入文坛)
- BioEPI: 2
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 149.9
- 红花: 3
- 帖子: 17
- 在线: 5.7小时
- 虫号: 1297263
- 注册: 2011-05-16
- 专业: 动物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★
amisking(金币+4, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-17 19:12:30
zxzhouwhu(金币+4): 2011-08-04 11:01:31
amisking(金币+4, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-17 19:12:30
zxzhouwhu(金币+4): 2011-08-04 11:01:31
|
关于细胞消化的问题： 1.胰酶一般是在37度预热，这样消化效果比较好 2. 对于比较好消化的细胞以及贴壁容易掉落的细胞如293t之类的，胰酶可以预热或者不预热都可以，一般很快就可以消化下来，而且这类细胞消化时间不宜长，对细胞自身不好。一般是通过吹打使细胞分散成单个的。 3.对于较难消化的细胞，例如一般的上皮细胞（hela，L02，COS）之类的，我一般是采用弃掉培养基之后，小加入少量的胰酶，预消化一次，大约几十秒吧，然后吸掉（这个是为了预消化的同时去掉未吸干净的培养基，培养基对于胰酶的消化有抑制作用），再加入新的胰酶（预热好的），2-3分钟即可。 4 对于特别难消化的细胞，你可以直接将预热的培养基加入细胞之中，并且在37度消化，你自己注意时间，别太过了，很容易过头。这个是我们之前培养MDCK这种十分紧密的上皮细胞采取的办法。 对于你的MCF-10a ，没有养过。你可以采取较难消化的那种，实在不行的话你就在37度消化吧。 此外，个人认为将胰酶预热至37度是极为重要的。因为我们保存胰酶是在4度，胰酶消化的合适温度为37度 |
4楼2011-07-16 22:12:57
dhd997
荣誉版主 (文坛精英)
自由人，我型我秀！
- BioEPI: 2
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 4.021
- 金币: 22094.4
- 散金: 1968
- 红花: 45
- 沙发: 161
- 帖子: 22410
- 在线: 927.9小时
- 虫号: 500412
- 注册: 2008-02-13
- 性别: GG
- 专业: 生物化工与食品化工
- 管辖: 分子生物
2楼2011-07-16 18:54:13
yuandian114
银虫 (初入文坛)
- BioEPI: 3
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 294.6
- 帖子: 21
- 在线: 13.2小时
- 虫号: 1344876
- 注册: 2011-07-13
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
3楼2011-07-16 19:20:58
nagasaki
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 52 (初中生)
- 金币: 3417.2
- 散金: 1853
- 红花: 10
- 帖子: 1741
- 在线: 1496.6小时
- 虫号: 419258
- 注册: 2007-07-05
- 专业: 药剂学
5楼2011-07-18 09:36:20
6楼2011-07-21 20:57:52
7楼2012-03-29 14:33:37
8楼2012-07-11 09:02:25
9楼2013-10-12 16:56:01
10楼2014-05-29 10:18:50
25