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dwj042310

铜虫 (初入文坛)

[求助] PC12细胞 培养的问题

以前没养过细胞,刚学习了一阵子,自己还没开始动手做。
现在听说PC12细胞有未分化型、低分化、高分化三种。
没有离心96孔板的设配,所以希望进行贴壁培养,但是不太想用胰酶消化,怕影响长势。
求问做MTT实验 哪种类型的PC12会比较好。
初学者,先谢过大家了
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玉剑蓝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2012-04-19 22:48:21
dwj042310: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-04-23 01:03:25
血清多用点(我用了20%),应该长的还好的,我刚前段时间用胰酶消化过,没事的,不消化的话怎么种板啊?我用了高分化的,这个根据实验需要的吧~
2楼2012-04-19 20:54:14
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dwj042310

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 玉剑蓝 at 2012-04-19 20:54:14:
血清多用点(我用了20%),应该长的还好的,我刚前段时间用胰酶消化过,没事的,不消化的话怎么种板啊?我用了高分化的,这个根据实验需要的吧~

问一下,高分化的传代大概多久啊
3楼2012-04-19 22:40:18
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玉剑蓝

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dwj042310 at 2012-04-19 22:40:18:
问一下,高分化的传代大概多久啊

我还刚开始做 感觉如果一个皿长满传三个的话 四五天能长满吧 长起来有点慢的~
4楼2012-04-21 18:19:56
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玉剑蓝

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by dwj042310 at 2012-04-19 22:40:18:
问一下,高分化的传代大概多久啊

再补充一下原先长了两三天的板,还稀稀疏疏的,我两天没去看,结果整个板爆满,估计就在第四天的时候就算是长满了吧,也可能是20%的血清是用太多了,刚开始的时候加10%长的实在太慢~
5楼2012-04-23 21:40:09
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dwj042310

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 玉剑蓝 at 2012-04-23 21:40:09:
再补充一下原先长了两三天的板,还稀稀疏疏的,我两天没去看,结果整个板爆满,估计就在第四天的时候就算是长满了吧,也可能是20%的血清是用太多了,刚开始的时候加10%长的实在太慢~

问一下培养基中除了胎牛血清以外,马血清和L-谷氨酸是必须加的么?
6楼2012-04-24 14:49:28
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玉剑蓝

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by dwj042310 at 2012-04-24 14:49:28:
问一下培养基中除了胎牛血清以外,马血清和L-谷氨酸是必须加的么?

我没加马血清 长的也还行 不过L-谷氨酸可能培养基中本来就有 我没注意~
7楼2012-04-24 20:17:44
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daiqian

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
dwj042310: 金币+2, ★★★很有帮助 2012-04-25 20:35:27
PC12细胞传代的时候可以不用胰酶,通过吹打下来(细胞80%时吹打比较容易,太满了不好吹打)。一般用10%的胎牛就可以了。
8楼2012-04-25 18:11:06
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dwj042310

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
8楼: Originally posted by daiqian at 2012-04-25 18:11:06:
PC12细胞传代的时候可以不用胰酶,通过吹打下来(细胞80%时吹打比较容易,太满了不好吹打)。一般用10%的胎牛就可以了。

对了,上次忘了问,血清需要灭活么?
9楼2012-05-12 22:59:01
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嘿嘿2009

新虫 (初入文坛)

请问大家,我的未分化PC12现在长的很慢?基本已经长了10天了,还是没长满,是哪出现问题了吗?我用胰酶消化的,而且没去胰酶,直接加的含血清培养液
10楼2014-03-16 12:14:24
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