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fanny9900108金虫 (小有名气)
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细胞培养中的问题
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Sample Text 请教高手，为什么我养的HEp G2老是生长的很慢，而且死细胞很多，一般传代后的新的培养瓶特别不容易长起来，上面培养液上老是飘着许多死细胞！！！！ |
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 【分子生物】EPI帖 | 细胞生物学实验经验 |
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6楼2012-03-21 10:24:36
qingyuansw20
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, 说得很详细了！ 2012-03-21 19:00:10
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+5, MolEPI+1, 说得很详细了！ 2012-03-21 19:00:10
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这个细胞我养过给您几个建议： 1、复苏后刚开始几天偶尔会出现长的慢情况（原因不明），但是成长1周左右（细胞密度达90%）传代后恢复状态。 2、确定没有污染后。很可能是细胞恢复期营养跟不足。更换DMEM培养基和hyclone胎牛血清（20%），等恢复生长后更换普通培养基和血清。 3、消化时间把握好，此细胞难消化，当消化时细胞变圆立刻弃去胰酶（含EDTA），然后利用残余胰酶继续消化，当周围变透明时吹打细胞。 4、死细胞会影响活细胞的成长，针对你所叙述情况，传代后4小时建议换液一次，并且最好30小时以上别动培养瓶，经常动培养瓶细胞会长不好的。 |
7楼2012-03-21 14:43:43
10楼2012-03-21 20:27:57
孙启亮
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2楼2012-03-20 18:00:16
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3楼2012-03-20 19:21:33
fanny9900108
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fanny9900108
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8楼2012-03-21 18:11:36
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9楼2012-03-21 18:11:59
