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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助血管内皮细胞培养问题（急）
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lililxmc

木虫 (正式写手)

[交流] 求助血管内皮细胞培养问题（急） 已有2人参与

求助。我从四医大购买的血管内皮细胞EVC-304, 拿回来时，将细胞培养瓶里灌满的培养基（1640+胎牛血清）收集后直接用于培养，增值后冻存了十多管（DMSO：胎牛血清=1：9），一个星期后再复苏，自己配的1640，细胞刚开始看着是圆形透亮，轮廓清晰，但12h就全死了，当时同一期买了4株细胞，都一起冻存的，一起复苏其他几株都长的挺好的。郁闷很，求助，高手帮帮忙，看我错在哪了，还是这个细胞要添加什么因子才可以啊？

[ Last edited by lililxmc on 2009-10-26 at 16:07 ]
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1楼 2009-10-26 11:07:55
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lililxmc

木虫 (正式写手)
不把奖金表明，看来是没人会帮助了，加了钱了，希望有高手指点，自己先顶一下
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2楼2009-10-26 15:40:53
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xiumeinm

金虫 (正式写手)
★
lililxmc(金币+1):谢谢参与
你可以直接和卖方咨询呀，现在不都有售后服务，他们的细胞他们最清楚，也许不是你的方法问题呢。
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3楼2009-10-27 21:27:49
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xiumeinm

金虫 (正式写手)
你可以直接和卖方咨询呀，现在不都有售后服务，他们的细胞他们最清楚，也许不是你的方法问题呢。
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4楼2009-10-27 21:28:15
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louyiceng
★
lililxmc(金币+1):谢谢参与
5楼2010-03-24 13:20:00
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liuxx123

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我们实验室也出现过这样的问题。有没有注意冻存液配制的时候避光。DMSO见光放热，因此在往细胞中加入的过程确保不热。
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liuxiaoxia
6楼2010-06-03 10:43:33
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weiyanbme

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
最好加HAT培养基（HAT系次黄嘌呤（hypoxantin）、氨基蝶呤（aminopterin）和胸腺嘧啶脱氧核苷（thymidin）三种物质各英文首字之缀列，HAT培养基也就是指含有这三种物质的细胞培养基。），我当时想养HUVEC时，老师说要加HAT，我就问了下试剂公司，说是sigma的，好贵，我就没养，你可以问问
还有在复苏的时候建议离心下，去除DMSO等；在冻存的时候减少DMSO的量
我看到ATCC上用的都是5%的量
祝好运
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7楼2010-06-03 11:53:15
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