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【求助】取小鼠血管内皮细胞
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【求助】取小鼠血管内皮细胞
请问哪位做过这个实验,请指教。。。
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2010-12-22 19:10:56
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有没有高手啊。。。
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2010-12-22 19:17:44
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具体点就是想先把小鼠的内皮细胞取出来,然后种到我的材料上。。。模拟血管。。。
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3楼
2010-12-22 19:45:36
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论!! 2010-12-22 22:06:48
yusen_1982:你可以升级了,不是新虫了,呵呵 2010-12-22 22:07:03
americanyk(金币+1):Thank you 2010-12-23 18:48:53
偶做的是大鼠内皮细胞的培养 也不知道对楼主有帮助不
雄性Wistar 大鼠,3.5%水合氯醛腹腔麻醉,断头后浸泡于75%酒精中2分钟,无菌条件下取脑。将鼠脑在PBS中冲洗2遍后,在冲洗液中剥离软脑膜及肉眼可见的大血管,去除大脑白质及小脑,收集大脑皮质,充分剪碎。将剪碎的脑组织制成匀浆后过145um滤网,取滤液过75um滤网,弃滤液,用冲洗液冲洗并收集滤网上的血管段。将血管段置于2个离心管内于1500rpm离心8min后加入0.1%II型胶原酶在37度水浴中消化15min,1500rpm离心5min,冲洗液吹打均匀后1500rpm离心5min ,反复3次,最后1次离心后,弃上清,用培养液重悬沉淀,制成大鼠微血管段悬浮液,接种于预先铺好明胶的培养瓶中。在CO2培养箱中孵育1.5h后,小心吸弃上清液的一半,培养3天后换液。7-8天细胞长成融合状态,1:2传代,细胞传代至第3代用于实验
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4楼
2010-12-22 20:33:09
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