| 查看: 1253 | 回复: 3 | ||||
[交流]
【求助】取小鼠血管内皮细胞
|
| 请问哪位做过这个实验，请指教。。。 |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 细胞培养 |
» 猜你喜欢
【经验分享】体外转录踩坑无数，挖到一款好用的国产 T7 RNA 聚合酶
已经有0人回复
-
体外转录 / PCR 总提不上产量？终于找到稳定好用的无机焦磷酸酶
已经有5人回复
-
生物力学与组织工程学论文润色/翻译怎么收费?
已经有200人回复
-
[会议预告]2026生物医药产业发展大会
已经有0人回复
-
【产品测评分享】体外转录产量不理想、dsRNA 副产物高？T7 RNA 聚合酶实测体验
已经有5人回复
-
【交流】蛋白标签切除踩坑不断？聊聊 TEV 蛋白酶实操体会
已经有0人回复
-
【交流】SUMO 融合蛋白切标签踩坑？聊聊 SUMO 蛋白酶实操体会
已经有1人回复
-
这些国际期刊正在招募青年编委
已经有22人回复
-
间充质干细胞（MSC）用 化学成分限定培养基鉴定方法
已经有0人回复
-
投稿求助
已经有2人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 【转帖】硫化氢： 救命的毒气
已经有7人回复
- 求助血管内皮细胞培养问题（急）
已经有6人回复
2楼2010-12-22 19:17:44
3楼2010-12-22 19:45:36
★ ★
qc2121(金币+5): 2010-12-22 21:02:39
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！ 2010-12-22 22:06:48
yusen_1982:你可以升级了，不是新虫了，呵呵 2010-12-22 22:07:03
americanyk(金币+1):Thank you 2010-12-23 18:48:53
qc2121(金币+5): 2010-12-22 21:02:39
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！ 2010-12-22 22:06:48
yusen_1982:你可以升级了，不是新虫了，呵呵 2010-12-22 22:07:03
americanyk(金币+1):Thank you 2010-12-23 18:48:53
|
偶做的是大鼠内皮细胞的培养 也不知道对楼主有帮助不 雄性Wistar 大鼠，3.5%水合氯醛腹腔麻醉，断头后浸泡于75%酒精中2分钟，无菌条件下取脑。将鼠脑在PBS中冲洗2遍后，在冲洗液中剥离软脑膜及肉眼可见的大血管，去除大脑白质及小脑，收集大脑皮质，充分剪碎。将剪碎的脑组织制成匀浆后过145um滤网，取滤液过75um滤网，弃滤液，用冲洗液冲洗并收集滤网上的血管段。将血管段置于2个离心管内于1500rpm离心8min后加入0.1%II型胶原酶在37度水浴中消化15min,1500rpm离心5min，冲洗液吹打均匀后1500rpm离心5min ,反复3次，最后1次离心后，弃上清，用培养液重悬沉淀，制成大鼠微血管段悬浮液，接种于预先铺好明胶的培养瓶中。在CO2培养箱中孵育1.5h后，小心吸弃上清液的一半，培养3天后换液。7-8天细胞长成融合状态，1：2传代，细胞传代至第3代用于实验 |
4楼2010-12-22 20:33:09