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【求助】取小鼠血管内皮细胞
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| 请问哪位做过这个实验，请指教。。。 |
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 细胞培养 |
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2楼2010-12-22 19:17:44
3楼2010-12-22 19:45:36
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qc2121(金币+5): 2010-12-22 21:02:39
yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！ 2010-12-22 22:06:48
yusen_1982:你可以升级了，不是新虫了，呵呵 2010-12-22 22:07:03
americanyk(金币+1):Thank you 2010-12-23 18:48:53
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yusen_1982(金币+1):欢迎讨论！！ 2010-12-22 22:06:48
yusen_1982:你可以升级了，不是新虫了，呵呵 2010-12-22 22:07:03
americanyk(金币+1):Thank you 2010-12-23 18:48:53
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偶做的是大鼠内皮细胞的培养 也不知道对楼主有帮助不 雄性Wistar 大鼠，3.5%水合氯醛腹腔麻醉，断头后浸泡于75%酒精中2分钟，无菌条件下取脑。将鼠脑在PBS中冲洗2遍后，在冲洗液中剥离软脑膜及肉眼可见的大血管，去除大脑白质及小脑，收集大脑皮质，充分剪碎。将剪碎的脑组织制成匀浆后过145um滤网，取滤液过75um滤网，弃滤液，用冲洗液冲洗并收集滤网上的血管段。将血管段置于2个离心管内于1500rpm离心8min后加入0.1%II型胶原酶在37度水浴中消化15min,1500rpm离心5min，冲洗液吹打均匀后1500rpm离心5min ,反复3次，最后1次离心后，弃上清，用培养液重悬沉淀，制成大鼠微血管段悬浮液，接种于预先铺好明胶的培养瓶中。在CO2培养箱中孵育1.5h后，小心吸弃上清液的一半，培养3天后换液。7-8天细胞长成融合状态，1：2传代，细胞传代至第3代用于实验 |
4楼2010-12-22 20:33:09