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【求助/交流】询问菌种保存及培养问题 已有8人参与
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我现在购买了白色念珠菌，黑曲霉，生孢梭菌，枯草芽孢杆菌的菌种，是斜面的。（我们是打算做微生物限度检查。）听说只能活1个月左右。所以我们现在要保存起来。请问应该用什么方面保存，用什么培养基？ 而且我们的菌种是3代的了。要求使用时不超过5代。如果我现在用纸片保存，那么经过传到平板后保存的是4代的，对吗？如果以后使用，是不是必须还要在接种到平板上？那么是不是我使用的就只能是5代了？ 有没有好点的方法，使我使用时是4代呢？ 谢谢大家 |
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jingcp200320
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yushanyou12
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+5):good idea！ 2010-04-22 11:46
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 我以前就是药厂做微生物的，限度无菌都做，使用的菌也就是你说的那些，不过还有些其他的菌给你讲讲我们使用的菌种保藏吧，很省钱的哦，也符合药监局检查时的标准。 我们一般用到大肠杆菌，金葡菌，黑曲霉，白色念珠球菌，生孢梭菌，枯草芽孢等，我们的目的是保藏一年，标准是买进时是第二、三代，使用时不超过第五代。 方法：普通冰箱0度一下冷藏。先把买回来的二代菌在相应的培养基中培养分离，观察菌落形态和做革兰氏染色，确定是我们所需要的菌后，再事先准备好半固体琼脂小管，接着用接种环挑取菌落穿刺接种于琼脂的斜面及高层，然后在覆盖上事先准备好的灭过菌并干燥过的液体石蜡，约1CM。就可以冷藏了，有效期一年。 一般是制备12支，然后要用时在取出一支活化后划线接种于琼脂斜面，培养24小时候，冷藏在冰箱里，有效期一月，这个制备4支。这样就能保证每周都有菌用了，使用时是第四代或第五代。 如果你的是第三代想用第四代的话，就可以把买回来的菌斜面跳过平板划线形态及革兰氏检查（正规渠道买的菌一般还是可靠的），直接做半固体穿刺接种以后用液体石蜡封起来后冷藏（多做几支）。使用时再活化后划线于营养琼脂斜面，培养24小时，这时就可以挑取菌落使用了（第四代），有效期一个月(这个斜面制备4支冷藏，那么就可以每周使用一支了)。也就是说你的石蜡管做了几支就可以用几个月，但最多是一年。 [ Last edited by yushanyou12 on 2010-4-22 at 09:19 ] |
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