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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 【求助】关于RAW 264.7细胞培养的问题 求助！！
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judy001

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于RAW 264.7细胞培养的问题 求助！！ 已有16人参与

看了一些文献 对RAW 264.7细胞的传代培养有些疑惑，
想请教下各位  ATCC上推荐的不用胰酶消化 要用细胞刮
可是我在有些文献上看到 又用到了胰酶消化 到底传代的方式是怎样呀？
真的可以用胰酶 消化RAW 264.7细胞吗 ？还是只能用细胞刮 获取细胞？

另外 为什么有的细胞不能用胰酶消化呢？

初次养细胞没经验 望大家指点

谢谢大家了！！！
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1楼 2009-12-27 21:54:22
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

0107shijie

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
前辈你好！
我是南京医科大学研二的学生！也有做过RAW 264.7，具体做了细胞内存活 吞噬，这个细胞开始养的时候还行！可后来状态就不行，有时候贴壁贴的很是厉害都消化不下来！
我还想着继续重复试验可是细胞一直养不好！
请问您可不可以赠送我一盘你们养的细胞给我，看看，希望得到你的帮助！
请问方便吗？
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9楼2011-05-19 16:55:53
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普通回帖

lyh568

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
louyiceng(金币+1,VIP+0):谢谢参与 12-28 07:53
judy001(金币+3,VIP+0): 12-28 09:12
可以，主要是控制时间，有的细胞胰酶稍微消化过头细胞就损伤了，很难贴壁，刮其实也是对细胞有损伤的，一般控制好时间，raw细胞还是很好养的
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2楼2009-12-27 22:03:44
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liudaihualyh

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
louyiceng(金币+1,VIP+0):谢谢参与 12-28 07:53
judy001(金币+3,VIP+0): 12-28 09:12
基本同意楼上讲法，培养前一定要仔细看说明
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3楼2009-12-27 22:07:05
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judy001

银虫 (小有名气)
★ ★
xillpei(金币+2,VIP+0):鼓励交流 12-29 12:35
引用回帖:
Originally posted by lyh568 at 2009-12-27 22:03:
可以，主要是控制时间，有的细胞胰酶稍微消化过头细胞就损伤了，很难贴壁，刮其实也是对细胞有损伤的，一般控制好时间，raw细胞还是很好养的

RAW细胞是贴壁太紧 所以ATCC才建议是用细胞刮吗？
细胞刮相比和胰酶消化哪种比较好呀？
如果用胰酶的话 浓度和消化时间多少最好呢？

请大家给点建议 马上就要养细胞了 很着急 谢谢了啊！！！
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4楼2009-12-28 09:43:30
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zhangrijin

木虫 (正式写手)
judy001(金币+2): 2010-05-01 09:24
judy001(金币+1): 2010-05-12 21:26:36
用胰酶更容易些，但要控制好时间
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5楼2010-04-27 21:40:13
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DIEGOT

judy001(金币+1): 2010-05-12 21:26:49
用细胞刮的机械方法适合获取细胞后马上检测，而如果只是传代的话，RAW细胞还是用0.25%的胰酶消化最好，消化液里最好加2mM/100ml的EDTA,便于消化细胞，
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efish424
6楼2010-05-12 16:48:11
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judy001

银虫 (小有名气)
谢谢大家的回复 和建议
不过最近养了上海细胞库买来的raw细胞有一段时间了
听一位在行的朋友说过 库里面买回来的细胞最开始的那几代是很好消化的 一两分钟就可以了，养着养着，传代次数多了后就变的不好消化了。
可是我的细胞已经传到十几代了，用胰酶EDTA消化的时间依然在一两分钟左右就好了，并没有像他们说的那样很难消化下来呀，很困惑。。。。为什么会这样呀。。。。
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7楼2010-05-12 21:26:14
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范子莱

新虫 (初入文坛)

RAW264.7细胞培养

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
紧急求助，谢谢大家帮帮忙，我养的RAW264.7细胞总长不满，很多天都不见愈合，细胞复苏长满之后，细胞形态变大，慢慢扩散掉，怎么回事啊？
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8楼2010-06-17 12:55:17
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陈赓大将

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用细胞刮比较好，本人一直用的这个，刮过的细胞很容易贴壁，不用担心
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10楼2012-08-27 16:42:48
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