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judy001

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】关于RAW 264.7细胞培养的问题 求助!! 已有16人参与

看了一些文献 对RAW 264.7细胞的传代培养有些疑惑,
想请教下各位  ATCC上推荐的不用胰酶消化 要用细胞刮
可是我在有些文献上看到 又用到了胰酶消化 到底传代的方式是怎样呀?
真的可以用胰酶 消化RAW 264.7细胞吗 ?还是只能用细胞刮 获取细胞?

另外 为什么有的细胞不能用胰酶消化呢?

初次养细胞没经验 望大家指点

谢谢大家了!!!
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judy001

银虫 (小有名气)

谢谢大家的回复 和建议
不过最近养了上海细胞库买来的raw细胞有一段时间了
听一位在行的朋友说过 库里面买回来的细胞最开始的那几代是很好消化的 一两分钟就可以了,养着养着,传代次数多了后就变的不好消化了。
可是我的细胞已经传到十几代了,用胰酶EDTA消化的时间依然在一两分钟左右就好了,并没有像他们说的那样很难消化下来呀,很困惑。。。。为什么会这样呀。。。。
7楼2010-05-12 21:26:14
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lyh568

铜虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★
louyiceng(金币+1,VIP+0):谢谢参与 12-28 07:53
judy001(金币+3,VIP+0): 12-28 09:12
可以,主要是控制时间,有的细胞胰酶稍微消化过头细胞就损伤了,很难贴壁,刮其实也是对细胞有损伤的,一般控制好时间,raw细胞还是很好养的
2楼2009-12-27 22:03:44
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liudaihualyh

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
louyiceng(金币+1,VIP+0):谢谢参与 12-28 07:53
judy001(金币+3,VIP+0): 12-28 09:12
基本同意楼上讲法,培养前一定要仔细看说明
3楼2009-12-27 22:07:05
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judy001

银虫 (小有名气)

★ ★
xillpei(金币+2,VIP+0):鼓励交流 12-29 12:35
引用回帖:
Originally posted by lyh568 at 2009-12-27 22:03:
可以,主要是控制时间,有的细胞胰酶稍微消化过头细胞就损伤了,很难贴壁,刮其实也是对细胞有损伤的,一般控制好时间,raw细胞还是很好养的

RAW细胞是贴壁太紧 所以ATCC才建议是用细胞刮吗?
细胞刮相比和胰酶消化哪种比较好呀?
如果用胰酶的话 浓度和消化时间多少最好呢?

请大家给点建议 马上就要养细胞了 很着急 谢谢了啊!!!
4楼2009-12-28 09:43:30
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