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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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yhfs1018

银虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】一只菜鸟关于细胞培养的若干问题,求助老鸟~~

1、这个学期新复苏的U937很多碎片,恳请大家提供一个可行方案,对细胞进行优化选择。急~~~~
2、刚复苏不久的K562抱团现象很明显,已经传至第四代,没有什么改善,怎么办???
3、液氮罐里的液氮液面降至一半高度,很多细胞都暴露在液氮外,持续了半个月。这种情况会对细胞有什么影响??
4、配好的L-Gln溶液在室温下能存放多长时间??
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)



silicare(金币+1): 谢谢参与 2011-02-24 12:10:15
U937养呗,取少量细胞传代,碎片慢慢减少。
Gln容易分解,室温下放几天就不行了吧。
2楼2011-02-24 09:13:58
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WAX2010

银虫 (小有名气)


yhfs1018(金币+1): 2011-03-20 15:17:41
细胞不一定要全部浸在液氮里吧,只要罐中液氮不是太少,能够保持里面的低温就好了啊,-80℃冰箱还能保存细胞好久呢。
3楼2011-02-24 09:40:53
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gorrylee

铜虫 (初入文坛)


★ ★ ★
silicare(金币+3): 鼓励新虫参与 2011-02-24 12:10:34
1.2建议用轻轻吹打,小孔板来培养几代,逐步放大培养
4楼2011-02-24 09:55:59
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wuw579

铁杆木虫 (正式写手)


★ ★
silicare(金币+2): 谢谢分享 2011-02-24 12:10:45
1、2:胰酶消化时间长一些,培养基中和吹打均匀后换成小培养皿养,再换成大一点的
3:细胞肯定死了,我的细胞也有过一样的情况,全死了
5楼2011-02-24 10:17:22
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_落落_

木虫 (初入文坛)


★ ★ ★
silicare(金币+3): 谢谢参与 2011-02-24 12:10:58
yhfs1018(金币+2): 2011-03-20 15:16:56
1.复苏细胞有大量碎片,很有可能是融化时间过久,冰晶对细胞造成伤害,造成细胞破裂,加快细胞融化过程,可以用37度水浴箱,或者双手快速揉搓,尽量在1分钟内融解细胞。
2.可能是因为此细胞有抱团生长特性,可上ATCC查询细胞背景特性,如果没有说明此细胞是抱团生长,可能是传代时消化吹打不够,没有把细胞吹打成一两个一起的细胞悬液,导致细胞抱团生长。
3.液氮是创造低温环境,只要液氮罐密闭够好,有1/3的液氮也可能保证罐内低温,细胞不会有影响,但是液氮低于1/3最好及时灌液氮,避免温度升高。
4.Gln易降解,最好现配现用,如果配早了放4度冰箱,过夜的我用过没出现问题,时间长的话最好重新配制。
6楼2011-02-24 10:17:58
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cheo163

金虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by _落落_ at 2011-02-24 10:17:58
1.复苏细胞有大量碎片,很有可能是融化时间过久,冰晶对细胞造成伤害,造成细胞破裂,加快细胞融化过程,可以用37度水浴箱,或者双手快速揉搓,尽量在1分钟内融解细胞。
2.可能是因为此细胞有抱团生长特性,可上AT ...

楼上的很详细,同意。Gln在4度冰箱只要不超过一周都没问题,配好后就放-20度冰柜,现用现融
7楼2014-08-28 16:14:01
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