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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助关于细胞培养的问题
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)

[求助] 求助关于细胞培养的问题

各位战友，
我养的HepG2，不知为什么这几代开始突然间培养基很容易变黄，即细胞贴壁后五个小时即能变黄，细胞单层尚不足50 %。以前都是大概快长满了还不是很黄。请教大家这是什么原因？另注明没有污染的迹象。
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1楼 2011-06-23 23:21:57
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xiaoqiang100

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
xuehu2008(金币+2): 2011-06-24 18:17:20
silicare(金币+2, EPI+1): 如果排除污染 2011-06-25 09:12:30
你讲的太简短了，我也不好具体分析，只给你提几个建议吧！
1.你在配培养基的时候HEPES加够了吗？如果没有加pH缓冲液的话溶液的pH变化会很快的。
2.我记得在配培养液的时候要加碳酸氢钠来调pH，不知道你调了没。
总之我觉得问题应该是你在配培养基的时候出的问题，颜色变黄不就是因为pH太低造成的吗？
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谁知道一个大学学物理，但研究生阶段天天养细胞的寂寞！?
2楼2011-06-24 10:54:13
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纯渴

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

xuehu2008(金币+1): 2011-06-24 18:17:37
还有就是要看看是拿里来的，G2细胞形态有些不同，成团也是正常现象，刚从别人那问来的
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3楼2011-06-24 12:29:26
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yw_1009

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

xuehu2008(金币+2): 2011-06-24 18:17:46
如果细胞PH值变化比较剧烈，建议加HEPES增加培养液的缓冲能力
另外培养基需要加碳酸氢钠，如果加了，检查一下二氧化碳培养箱是否有问题
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4楼2011-06-24 14:59:46
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xuehu2008

铜虫 (正式写手)
嗯哪，有道理，但估计不是缓冲的问题。同样培养基养其他好几种细胞都没这个问题啊。
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5楼2011-06-24 18:18:50
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qiang7

金虫 (小有名气)
肯定是污染了 你细细观察 高倍镜下看
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6楼2011-06-26 23:25:00
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蝈_屯

新虫 (初入文坛)
估计是缓冲液的PH发生了变化，最好拿PH仪测一下
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7楼2011-06-27 22:03:28
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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)
你用的是自己配的培养基 还是买的
1如果是自己配的那就是缓冲体系或者是FBS加的不够
2 你的细胞有病毒污染 如果细胞形态在改变，而且细胞状态不好的话建议做个支原体检测看看
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8楼2011-07-16 10:13:04
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