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mege123

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】关于水凝胶的细胞培养 已有3人参与

请教:水凝胶做细胞培养的时候要注意哪些方面呢?

1.水凝胶的消毒,以及消毒程序。单用紫外就可以了么?
2.水凝胶吸水后会涨得很大的,不能保证表面的平整,该如何?
3.水凝胶吸PBS,培养基……溶液的速度很慢,和通常的培养细胞不同,该如何控制好时间?
4.如何观察细胞的生长情况?
5.要是做细胞的SEM要注意的问题,比如有水,有溶剂怎么办?

可能还有某些地方没有想到,希望大家共同探讨!谢谢
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江水之

木虫 (正式写手)

mege123(金币+3): 2010-05-09 13:33:01
1.消毒:75%酒精泡 2小时,在紫外照射1小时!
2.溶胀结束了你在把表面修理一下
3.不是很明白什么意思?你是把干凝胶放进去培养吗?
4.染色,或者荧光标记 拍照
5.冷冻干燥?
2楼2010-05-09 09:35:02
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mege123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 江水之 at 2010-05-09 09:35:02:
1.消毒:75%酒精泡 2小时,在紫外照射1小时!
2.溶胀结束了你在把表面修理一下
3.不是很明白什么意思?你是把干凝胶放进去培养吗?
4.染色,或者荧光标记 拍照
5.冷冻干燥?

1。酒精就会进入凝胶内部,不容易出来,对后续试验是否有影响?
2。怎么表面修饰?
3。不是干凝胶,之前要用PBS,培养基浸泡的
3楼2010-05-09 13:32:35
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江水之

木虫 (正式写手)

mege123(金币+2): 2010-05-14 00:08:19
1。进入内部你在用PBS洗几次就可以了!
2.不是修饰,是用刀重新切一下,或者刮一下
3.水凝胶吸PBS,培养基……溶液的速度很慢,和通常的培养细胞不同,该如何控制好时间? 这句话貌似有语病啊,不知道什么意思,是不是说之前要用PBS和培养基浸泡的 ,而材料对pbs吸收过快?你希望对培养基吸收的多吗?不要让我猜测啊,头好大啊,你说清楚下
4楼2010-05-09 14:39:30
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mege123

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 江水之 at 2010-05-09 14:39:30:
1。进入内部你在用PBS洗几次就可以了!
2.不是修饰,是用刀重新切一下,或者刮一下
3.水凝胶吸PBS,培养基……溶液的速度很慢,和通常的培养细胞不同,该如何控制好时间? 这句话貌似有语病啊,不知道什么意思, ...

凝胶在吸收大量的水后会很软的,刮不了。形状不好固定
凝胶之前要用PBS和培养基泡的,后面要将这两个东西吸出来,由于已经到了凝胶内部,所以说PBS和培养基很难出来的,对后面MTT实验或者SEM实验有没有影响呢?
5楼2010-05-09 15:41:20
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江水之

木虫 (正式写手)


yusen_1982(金币+1):欢迎讨论! 2010-05-12 15:16:53
mege123(金币+2): 2010-05-14 00:08:31
引用回帖:
Originally posted by mege123 at 2010-05-09 15:41:20:

凝胶在吸收大量的水后会很软的,刮不了。形状不好固定
凝胶之前要用PBS和培养基泡的,后面要将这两个东西吸出来,由于已经到了凝胶内部,所以说PBS和培养基很难出来的,对后面MTT实验或者SEM实验有没有影响呢?

1.如果吸收大量水会很软,那就在它吸收水还不是很多且有一定力学性能的时候切割,或者用线绳或者鱼线刮!
2.为什么之前要用PBS和培养基泡啊?泡完了还要用水再把它们泡出来那干脆用水好了。另外既然pbs和培养基能够进来那自然可以出去了!
说到影响,理论上MTT应该影响不大,至于SEM那就不知道了!
6楼2010-05-10 16:56:28
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淹不死的木头

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
很重要的一个问题是,培养基里面的营养物质,尤其是蛋白质,如何将进入到凝胶网络内部,供给细胞?
7楼2014-09-24 11:28:16
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