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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 【交流】25cm^2和75cm^2培养瓶的区别，关于悬浮的THP-1细胞培养
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)

[交流] 【交流】25cm^2和75cm^2培养瓶的区别，关于悬浮的THP-1细胞培养

使用25cm^2的小培养瓶培养THP-1细胞，竖立放置，细胞生长状态良好，二到三天培养液就非常的黄了，养了十来天，每三天一传代，感觉挺好的
因为需要的细胞量比较大，所以前天改成了用75cm^2的大培养瓶培养，发现培养液不怎么变色了，细胞散散的，数量不见增加
想了一下，THP-1细胞对细胞浓度的要求比较高，而本身又可以归属于半贴壁细胞，虽然培养液放了有30ml，但细胞都是沉在瓶底的，无论是大瓶还是小瓶，所以，相对于言，改用大瓶后，虽然细胞浓度一样，培养液的量也差不多，但沉积的面积大了，所以密度相对的是过低的，以致对细胞浓度有要求的THP-1细胞长不起来了
感觉，推理中有些问题，但又想不出更好的解释来，请各位虫友们指教
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1楼 2011-04-16 22:42:35
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
Chlo_Q(金币+5): 谢谢，给我了很有用的信息 2011-04-17 13:59:28
从25到75的过程中对细胞的密度是有要求的，有些细胞增殖能力很强的，比如杂交瘤细胞 ，扩大培养的时候密度稀一点问题还不是很大。过几天就能涨起来。一般细胞与细胞之间是有信号传递了，密度太低了，其周围的营养物质分泌不够的话，很难张起来，也有可能会看到部分细胞死亡的情况。
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2楼2011-04-17 11:48:01
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2011-04-17 11:48:01:
从25到75的过程中对细胞的密度是有要求的，有些细胞增殖能力很强的，比如杂交瘤细胞 ，扩大培养的时候密度稀一点问题还不是很大。过几天就能涨起来。一般细胞与细胞之间是有信号传递了，密度太低了，其周围的营养 ...

前辈您好
我是细胞实验新手，这里说的对密度有要求，是单指对贴壁细胞而言还是包括悬浮细胞啊？因为贴壁面积对于贴壁细胞的影响大些，而悬浮细胞是竖直放置的，只是瓶底面积会产生一定的影响，并不像贴壁面积那么大
我现在养的是悬浮细胞，三天一传代，大前天传到大瓶子里来之后已经三天了，考虑到操作要规则，所以还是打算给它传代了，虽然。。。现在的细胞数没见长。那我现在直接重新传到小瓶子里，应该对它的影响小些吧？
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3楼2011-04-17 14:27:29
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)
Chlo_Q(金币+5): 感谢 2011-04-17 15:32:37
悬浮细胞同样对密度有要求啊。太稀总是不好的。如果你要是有小瓶中长好的细胞，再给大瓶补点，看在三天后能提高数量不。要不然给你就要传很多小瓶来满足你试验中对细胞数量的要求了。
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4楼2011-04-17 15:02:35
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2011-04-17 15:02:35:
悬浮细胞同样对密度有要求啊。太稀总是不好的。如果你要是有小瓶中长好的细胞，再给大瓶补点，看在三天后能提高数量不。要不然给你就要传很多小瓶来满足你试验中对细胞数量的要求了。

恰恰原本养着的两小瓶都被我心急的同时传到大瓶里来了。我也不好合并，怕出问题就都完了，看来我只能是在今晚传回小瓶子里了
对了，话说我的密度没稀释啊，真的是沉积面积的问题吗？
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5楼2011-04-17 15:36:04
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)
忍了三天，本来三天一传代，这回扩大培养，养了6天（期间只补了两次液）
昨晚看了一下，有一瓶已经长了很多了，另一瓶长得一般般
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6楼2011-04-21 10:26:24
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