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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


[交流] 【交流】25cm^2和75cm^2培养瓶的区别,关于悬浮的THP-1细胞培养

使用25cm^2的小培养瓶培养THP-1细胞,竖立放置,细胞生长状态良好,二到三天培养液就非常的黄了,养了十来天,每三天一传代,感觉挺好的
因为需要的细胞量比较大,所以前天改成了用75cm^2的大培养瓶培养,发现培养液不怎么变色了,细胞散散的,数量不见增加
想了一下,THP-1细胞对细胞浓度的要求比较高,而本身又可以归属于半贴壁细胞,虽然培养液放了有30ml,但细胞都是沉在瓶底的,无论是大瓶还是小瓶,所以,相对于言,改用大瓶后,虽然细胞浓度一样,培养液的量也差不多,但沉积的面积大了,所以密度相对的是过低的,以致对细胞浓度有要求的THP-1细胞长不起来了
感觉,推理中有些问题,但又想不出更好的解释来,请各位虫友们指教
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


Chlo_Q(金币+5): 谢谢,给我了很有用的信息 2011-04-17 13:59:28
从25到75的过程中对细胞的密度是有要求的,有些细胞增殖能力很强的,比如杂交瘤细胞 ,扩大培养的时候密度稀一点问题还不是很大。过几天就能涨起来。一般细胞与细胞之间是有信号传递了,密度太低了,其周围的营养物质分泌不够的话,很难张起来,也有可能会看到部分细胞死亡的情况。
2楼2011-04-17 11:48:01
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2011-04-17 11:48:01:
从25到75的过程中对细胞的密度是有要求的,有些细胞增殖能力很强的,比如杂交瘤细胞 ,扩大培养的时候密度稀一点问题还不是很大。过几天就能涨起来。一般细胞与细胞之间是有信号传递了,密度太低了,其周围的营养 ...

前辈您好
我是细胞实验新手,这里说的对密度有要求,是单指对贴壁细胞而言还是包括悬浮细胞啊?因为贴壁面积对于贴壁细胞的影响大些,而悬浮细胞是竖直放置的,只是瓶底面积会产生一定的影响,并不像贴壁面积那么大
我现在养的是悬浮细胞,三天一传代,大前天传到大瓶子里来之后已经三天了,考虑到操作要规则,所以还是打算给它传代了,虽然。。。现在的细胞数没见长。那我现在直接重新传到小瓶子里,应该对它的影响小些吧?
3楼2011-04-17 14:27:29
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)


Chlo_Q(金币+5): 感谢 2011-04-17 15:32:37
悬浮细胞同样对密度有要求啊。太稀总是不好的。如果你要是有小瓶中长好的细胞,再给大瓶补点,看在三天后能提高数量不。要不然给你就要传很多小瓶来满足你试验中对细胞数量的要求了。
4楼2011-04-17 15:02:35
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


引用回帖:
Originally posted by dianaofyezi at 2011-04-17 15:02:35:
悬浮细胞同样对密度有要求啊。太稀总是不好的。如果你要是有小瓶中长好的细胞,再给大瓶补点,看在三天后能提高数量不。要不然给你就要传很多小瓶来满足你试验中对细胞数量的要求了。

恰恰原本养着的两小瓶都被我心急的同时传到大瓶里来了。我也不好合并,怕出问题就都完了,看来我只能是在今晚传回小瓶子里了
对了,话说我的密度没稀释啊,真的是沉积面积的问题吗?
5楼2011-04-17 15:36:04
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Chlo_Q

木虫 (著名写手)


忍了三天,本来三天一传代,这回扩大培养,养了6天(期间只补了两次液)
昨晚看了一下,有一瓶已经长了很多了,另一瓶长得一般般
6楼2011-04-21 10:26:24
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